抑制NEK7促进肝癌细胞凋亡的实验

R735.7; 目的 采用体外实验验证抑制NEK7表达后肝癌细胞增殖、衰老及凋亡的变化,并探索其机制.方法 Western blot及RT-PCR检测不同肝癌细胞系及人肝永生化THLE-2细胞系中的NEK7表达,针对NEK7基因序列设计抑制其表达的shRNA,转染肝癌细胞后,观察细胞体外增殖活性、衰老、凋亡及细胞周期的变化,Western blot检测抑制NEK7表达后细胞周期相关因子的变化.结果 肝癌细胞中NEK7呈高表达,shRNA慢病毒转染肝癌细胞抑制NEK7表达后,肝癌细胞增殖能力受到抑制,细胞衰老及凋亡比例显著升高,S及G2/M期细胞数明显减少,细胞周期受到阻滞, C-myc、c-F...

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Published in肿瘤防治研究 Vol. 48; no. 10; pp. 929 - 933
Main Authors 宋燕州, 张昆, 陈琦军, 魏文平, 赵新, 李志伟, 李伟
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 518000 深圳,深圳市第三人民医院(南方科技大学第二附属医院)肝胆外科%222000 连云港,连云港市第一人民医院(徐州医科大学附属连云港医院)肝胆外科 2021
Subjects
肝癌;NEK7;细胞周期
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Summary:R735.7; 目的 采用体外实验验证抑制NEK7表达后肝癌细胞增殖、衰老及凋亡的变化,并探索其机制.方法 Western blot及RT-PCR检测不同肝癌细胞系及人肝永生化THLE-2细胞系中的NEK7表达,针对NEK7基因序列设计抑制其表达的shRNA,转染肝癌细胞后,观察细胞体外增殖活性、衰老、凋亡及细胞周期的变化,Western blot检测抑制NEK7表达后细胞周期相关因子的变化.结果 肝癌细胞中NEK7呈高表达,shRNA慢病毒转染肝癌细胞抑制NEK7表达后,肝癌细胞增殖能力受到抑制,细胞衰老及凋亡比例显著升高,S及G2/M期细胞数明显减少,细胞周期受到阻滞, C-myc、c-Fos、cyclin D1、cyclin E等细胞周期因子表达水平受到抑制,P16及P27表达水平升高, CDK2、CDK4及CDK6的表达无明显变化.结论 靶向抑制NEK7表达,降低了肝癌细胞的增殖能力,并促进细胞衰老、诱导其凋亡,同时肝癌细胞周期进程受阻.
ISSN:1000-8578
DOI:10.3971/j.issn.1000-8578.2021.21.0261