隔药灸对TNF-αzjtnyx-e202101-NF-κB-MLCK介导克罗恩病肠上皮细胞紧密连接的影响

R2-03; 目的:探讨隔药灸对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)-核因子κB(NF-κB)-肌球蛋白轻链激酶(MLCK)介导克罗恩病(CD)肠上皮细胞紧密连接的影响.方法:将48只雄性SD大鼠随机分成正常组(NC)、模型组(MC)、隔药灸组(HPM)和美沙拉嗪组(MESA),每组12只.采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)制备CD模型,造模成功后HPM组采用隔药饼灸天枢和气海治疗,MESA组采用美沙拉嗪灌胃治疗.治疗结束后取各组结肠上皮组织分离、纯化和培养以建立体外肠上皮屏障模型,将100 ng/mL TNF-α分别与各组肠上皮细胞孵育培养24 h.应用跨上皮细胞电阻检测各组肠上皮屏障通透性...

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Published in针灸推拿医学（英文版） Vol. 19; no. 1; pp. 19 - 29
Main Authors 高艳玲, 王雨宁, 郭娅静, 孙怡, 王逸然, 周竞, 赵继梦, 吴焕淦, 施茵
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 2021
Subjects
核因子-κB
Myosin-Light-Chain Kinase
Indirect Moxibustion
紧密连接
Rats
Crohn Disease
Medicinal Cake-partitioned Moxibustion
Tumor Necrosis Factor-alpha
大鼠
NF-kappa B
药饼灸疗法
克罗恩病
Tight Junctions
间接灸
肌球蛋白轻链激酶
肿瘤坏死因子-α
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Summary:R2-03; 目的:探讨隔药灸对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)-核因子κB(NF-κB)-肌球蛋白轻链激酶(MLCK)介导克罗恩病(CD)肠上皮细胞紧密连接的影响.方法:将48只雄性SD大鼠随机分成正常组(NC)、模型组(MC)、隔药灸组(HPM)和美沙拉嗪组(MESA),每组12只.采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)制备CD模型,造模成功后HPM组采用隔药饼灸天枢和气海治疗,MESA组采用美沙拉嗪灌胃治疗.治疗结束后取各组结肠上皮组织分离、纯化和培养以建立体外肠上皮屏障模型,将100 ng/mL TNF-α分别与各组肠上皮细胞孵育培养24 h.应用跨上皮细胞电阻检测各组肠上皮屏障通透性;采用Western blot法检测TNF-α-NF-kB-MLCK介导的肠上皮细胞紧密连接的相关蛋白表达;应用免疫荧光法观察结肠上皮细胞紧密连接蛋白的表达与分布情况.结果:TNF-α诱导后,与MC+TNF-α组肠上皮细胞相比,HPM+TNF-α组及MESA+TNF-α组跨上皮电阻值显著升高(均P<0.001),结肠上皮NF-kBp65、MLCK、肌球蛋白轻链(MLC)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)及受体相互作用蛋白-1(RIP1)表达量显著降低(P<0.01或P<0.05),锌指蛋白A20(A20)表达量显著升高(P<0.01),occludin、claudin-1、紧密连接蛋白1(ZO-1)及F-actin表达量亦显著升高(均P<0.01);与MESA+TNF-α组相比,HPM+TNF-α组MLC,occludin,claudin-1,ZO-1及F-actin表达量显著升高(P<0.01或P<0.05).结论:隔药灸可能通过调控TNF-α-NF-kB-MLCK介导的CD肠上皮细胞紧密连接的异常,达到保护或修复CD大鼠肠上皮屏障损伤的效应.
ISSN:1672-3597
1993-0399