牙龈卟啉单胞菌重组牙龈蛋白酶刺激牙龈成纤维细胞内钙离子浓度变化及其机制

• Published in: 浙江大学学报（医学版） Vol. 50; no. 2; pp. 171 - 178
• Main Authors: 张迪亚, 卢可心, 李盛来, 吴燕岷
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 浙江大学医学院附属邵逸夫医院牙科,浙江杭州310016%浙江大学医学院附属第二医院牙周病专科,浙江杭州310009%浙江大学医学院附属口腔医院口腔外科,浙江杭州310006 2021
• Subjects: 蛋白酶激活受体; 钙离子; 信号通路; 牙龈蛋白酶; 人牙龈成纤维细胞
• ISSN: 1008-9292
• DOI: 10.3724/zdxbyxb-2021-0109

R781.4; 目的:探讨牙龈卟啉单胞菌重组牙龈蛋白酶(rRgpB)刺激蛋白酶激活受体(PAR)介导的人牙龈成纤维细胞(HGF)内钙离子浓度([Ca2+]i)的动态变化及细胞内信号转导通路.方法:流式细胞术检测HGF表达的PAR类型,CCK-8法检测细胞增殖,以牙龈卟啉单胞菌rRgpB作用于HGF,激光共聚焦显微镜观察HGF内[Ca2+]i的动态变化及PAR-1拮抗剂的阻断作用;蛋白质印迹法检测HGF内c-Jun氨基末端激酶(JNK)、胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、p38丝裂原激活的蛋白激酶(p38MAPK)、p65蛋白水平的变化.结果:HGF表达PAR-1和PAR-3,且rRgpB可促进HGF生长.细胞受到rRgpB作用后能激发瞬时增强的[Ca2+]i荧光信号,并且这种作用能够被PAR-1拮抗剂完全阻断;与空白对照组比较,rRgpB诱导细胞6、12h后,JNK、ERK1/2、p65磷酸化蛋白表达均显著上调(均P＜0.05),但p38MAPK磷酸化蛋白水平未见明显变化(P＞0.05);PAR-1拮抗剂成功抑制了 rRgpB诱导的JNK、ERK1/2、p65磷酸化蛋白表达的上调.结论:rRgpB通过PAR-1诱导HGF内[Ca2+]i增加,并激活细胞内JNK、ERK1/2、核因子κB信号通路.