节律分子Timeless调控糖代谢重编程促进肝癌细胞生长

• Published in: 中华肿瘤杂志 Vol. 40; no. 7; pp. 499 - 505
• Main Authors: 张建省, 袁鹏, 颜昭勇, 鲁睿, 李波, 耿晓恩, 牟佼, 张洪新
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 第四军医大学唐都医院疼痛科, 西安,710038%第四军医大学基础医学院教学实验中心, 西安,710032%第四军医大学基础医学院学员旅, 西安,710032%710003,西安市中心医院血液病研究所 2018
• Subjects: Reprogramming of glucose metabolism; Timeless; 糖代谢重编程; Carcinoma,hepatocellular; Proliferation; 癌,肝细胞; 生长; p53
• ISSN: 0253-3766
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-3766.2018.07.004

目的 探讨节律分子Timeless对肝癌细胞生长的影响及其分子机制.方法 采用肝癌公共数据信息分析Timeless在肝癌及癌旁组织中的表达;在高表达Timeless的肝癌细胞株MHCC97H和低表达Timeless的肝癌细胞株MHCC97L中,分别用RNA干扰和真核表达质粒方法沉默或上调肝癌细胞中Timeless的表达后,采用实时荧光定量PCR和Western blot检测干扰和过表达Timeless的效果以及Timeless下游分子的表达.采用葡萄糖摄取实验、乳酸检测实验、细胞外液pH检测实验、细胞氧耗实验和MTS实验,分析Timeless对肝癌细胞糖酵解、氧化磷酸化和细胞生长的影响.结果 肝癌组织中Timeless的表达高于癌旁组织(P＜0.05).敲低Timeless后,Timeless干扰组1和Timeless干扰组2细胞葡萄糖相对摄取水平分别为0.510±0.119和0.508±0.099,与对照组比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05);Timeless过表达组细胞葡萄糖相对摄取水平为1.953±0.324,与空质粒组比较,差异有统计学意义(P＜0.05). Timeless干扰组1和Timeless干扰组2细胞乳酸产生相对水平分别为0.579± 0.096和0.550±0.120,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);Timeless过表达组细胞乳酸产生相对水平为1.463±0.179,与空质粒组比较,差异有统计学意义(P＜0.05). Timeless干扰组1和Timeless干扰组2细胞外pH值为7.390±0.035和7.370±0.060,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);Timeless过表达组细胞外 pH 值为7.130±0.031,与空质粒组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).Timeless干扰组1和Timeless干扰组2细胞耗氧率分别为3.686 ± 0.389 和3.955 ± 0.431,与对照组(1.690±0.297)比较,差异有统计学意义(P＜0.05);Timeless过表达组细胞耗氧率为1.302±0.336,与空质粒组(3.185±0.262)比较,差异有统计学意义(P＜0.05). Timeless抑制p53的表达.与Timeless+p53对照组比较,Timeless+p53干扰组细胞葡萄糖相对摄取水平、乳酸产生相对水平、细胞外培