阿司匹林和氯吡格雷联合应用对小鼠脑缺血损伤后骨髓及脑内炎症反应的影响

• Published in: 中国卒中杂志 Vol. 17; no. 6; pp. 605 - 610
• Main Authors: 董雯, 姜鸣钰, 陈文涛, 刘文倩, 陈青芳, 赵顺英, 叶维贞, 温少红, 刘向荣
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 北京 100070 首都医科大学附属北京天坛医院 2022
• Subjects: 阿司匹林; 氯吡格雷; 中性粒细胞; 缺血性脑损伤; 小胶质细胞
• ISSN: 1673-5765
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-5765.2022.06.009

目的 探讨小鼠脑缺血损伤后阿司匹林和氯吡格雷联合应用21?d对骨髓中性粒细胞炎症因子及脑内小胶质细胞极化的影响.方法 雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、阿司匹林联合氯吡格雷组(双抗组)2组,每组10只.通过结扎大脑中动脉远端制作脑缺血再灌注模型(缺血60?min,解开结扎实现再灌注),再灌注即刻通过灌胃给予饮用水100?μL(对照组)和阿司匹林(剂量12?mg/kg,每只实际用量0.3?mg)与氯吡格雷(剂量12?mg/kg,每只实际用量0.3?mg)混悬液100?μL(双抗组),每日1次,连续21?d.21?d后处死小鼠,分离骨髓中性粒细胞,通过实时荧光定量PCR检测骨髓中性粒细胞相关炎症因子,包括IL-1β、IL-6、IL-10、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric-oxide synthase,iNOS)、TNFα、精氨酸酶1(arginase1,Arg1)、转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGFβ)、CD206、CD32、几丁质酶样蛋白(chitinase-like 3,Chil3/YM1)的表达情况.脑组织行冰冻切片,免疫荧光染色标记离子化钙结合适配分子1(ionized calcium binding adapter molecule 1,Iba1)、CD16和CD206,观察小胶质细胞数量、形态变化与极化状态.结果 与对照组相比,治疗21?d后双抗组小鼠骨髓中性粒细胞I L-1β的相对表达下降(0.703±0.124 vs.?1.000±0.203,P=0.019);YM1(2.173±0.968?vs.?1.000±0.282,P=0.019)和CD206(1.361±0.203 vs.?1.000±0.260,P=0.048)的相对表达上调.治疗21?d后双抗组与对照组梗死周边区的小胶质细胞数量差异无统计学意义,但双抗组CD16阳性(M1型)小胶质细胞数量降低(119.4±37.43个/平方毫米vs.?220.2±63.07个/平方毫米,P<0.001),CD206阳性(M2型)小胶质细胞数量增加(198.2±40.16个/平方毫米vs.?122.8±29.88个/平方毫米,P<0.001),且双抗组小胶质细胞形态上呈多分支网状结构.结论 阿司匹林与氯吡格雷联合应用可能通过抑制骨髓中性粒细胞炎症反应,增加脑内小胶质细胞分支,并激活小胶质