壮筋养血汤介导MAPK/P38-ERK通路调控成骨成脂分化的作用机制

• Published in: 中国骨质疏松杂志 Vol. 29; no. 8; pp. 1106 - 1128
• Main Authors: 温蕊嘉, 董鑫, 庄皓文, 王俊岩, 张锦芳
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 广州中医药大学第一临床医学院,广东广州510405 2023; 广州中医药大学深圳医院(福田),广东深圳518000%广州中医药大学第一附属医院,广东广州510405%广州中医药大学第一临床医学院,广东广州510405%广州中医药大学中药学院,广东广州510006%广州中医药大学深圳医院(福田),广东深圳518000
• Subjects: osteogenic and adipogenic differentiation; LncRNA ANRIL; MAPK/P38-ERK信号通路; 成骨成脂分化; Zhuangjin Yangxue Decoction; MAPK/P38-ERK; 壮筋养血汤
• ISSN: 1006-7108
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-7108.2023.08.003

R681; 目的 探讨壮筋养血汤(Zhuangjin Yangxue Decoction,ZJYXD)通过LncRNA ANRIL介导的MAPK/P38-ERK通路调控成骨成脂分化的作用机制.方法 提取骨髓间充质干细胞(BMSCs),并采用ANRIL慢病毒转染BMSCs;制备ZJYXD含药血清用于培养转染后的BMSCs.通过CCK-8检测BMSCs增殖活力;运用碱性磷酸酶、茜素红及油红O染色检测各组细胞成骨成脂分化情况;通过qRT-PCR、Western Blot法检测成骨、成脂、MAPK/P38-ERK信号通路相关基因及蛋白的表达.选取24只SPF级C57BL/6雄性小鼠用于制作股骨横断骨折模型,造模后给予不同转染的BMSCs治疗并给予ZJYXD.通过X-ray与Micro-CT检测对照组、对照组+ZJYXD组、ANRIL过表达组、ANRIL过表达+ZJYXD组小鼠骨愈合情况.结果 与0％含药血清相比,6％ZJYXD含药血清对BMSCs细胞增殖能力最强(P＜0.01).ZJYXD干预后成骨染色加深,成骨相关基因OPN、RUNX2 mRNA及蛋白表达显著升高(P＜0.01);成脂染色减弱,相关基因PPARγ、C/EBPα mRNA及蛋白表达显著降低(P＜0.01).同时ZJYXD促进了 P-ERK、P38蛋白表达(P＜0.01).X-ray及Micro-CT显示ZJYXD促进了小鼠骨折后愈合.当ANRIL过表达后,ZJYXD调节成骨成脂细胞分化作用消失,无法有效的促进骨折愈合.结论 壮筋养血汤具有促进成骨分化、抑制成脂分化的作用,而这种作用通过LncRNA ANRIL调控MAPK/P38-ERK信号通路实现.