槲皮素对人骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化的影响及分子机制

R336; 目的 探讨槲皮素对人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,hBMSCs)增殖和成骨分化以及对特异AT序列结合蛋白2(SATB2)基因表达的影响.方法 噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度槲皮素对hBMSCs增殖活性的影响,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)试剂盒检测ALP 活性,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测成骨分化生物标志物Runt相关转录因子2(Runx2)、骨钙素(BGLAP)和分泌磷酸蛋白1(SPP1)mRNA的表达,qRT-PCR和蛋白免疫印迹(Western blot)检测SA...

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Published in中国骨质疏松杂志 Vol. 28; no. 12; pp. 1765 - 1776
Main Authors 张波, 胡凌云, 苟林, 贾敏, 李永宁, 罗栩伟, 李伟
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 南充市中心医院骨科,四川 南充637000 2022
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Summary:R336; 目的 探讨槲皮素对人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,hBMSCs)增殖和成骨分化以及对特异AT序列结合蛋白2(SATB2)基因表达的影响.方法 噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度槲皮素对hBMSCs增殖活性的影响,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)试剂盒检测ALP 活性,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测成骨分化生物标志物Runt相关转录因子2(Runx2)、骨钙素(BGLAP)和分泌磷酸蛋白1(SPP1)mRNA的表达,qRT-PCR和蛋白免疫印迹(Western blot)检测SATB2 mRNA和蛋白表达变化,在hBMSCs转染SATB2特异性siRNA或SATB2过表达载体质粒,分析敲低或过表达SATB2对槲皮素干预的hBMSCs增殖和成骨分化的影响.结果 在一定范围内槲皮素呈浓度依赖性促进hBMSCs增殖,5 μmol/L时促进细胞增殖效果最佳,选择5 μmol/L的槲皮素用于后续研究.5 μmol/L的槲皮素能够有效促进ALP活性以及Runx2、BGLAP和SPP1 mRNA的表达,并且能够上调SATB2 mRNA和蛋白表达.敲低SATB2能够阻碍槲皮素对hBMSCs增殖和成骨分化的促进作用,而过表达SATB2能够增强槲皮素对hBMSCs增殖和成骨分化的促进作用.结论 槲皮素可通过上调SATB2基因的表达促进hBMSCs增殖和成骨分化.
ISSN:1006-7108
DOI:10.3969/j.issn.1006-7108.2022.12.011