强骨饮调节破骨细胞外泌体影响成骨细胞分化的初步研究

R-332; 目的 初步探究强骨饮调节破骨细胞来源外泌体影响成骨细胞分化的内在机制.方法 制备强骨饮含药血清,构建破骨分化和成骨分化模型.设置对照血清组和含药血清组,共同干预破骨细胞分化,找到最佳含药血清浓度.采用免疫印迹法检测两组细胞外泌体释放情况.将两组外泌体加入成骨分化模型中,采用化学发光法检测碱性磷酸酶(ALP)含量,采用实时荧光定量测量成骨特异性转录因子(Runx2)、骨桥蛋白(OPN)、骨钙素(OCN)表达情况.最后运用免疫印迹法检测强骨饮干预下破骨分化的β环状蛋白表达以及外泌体作用成骨分化的β环状蛋白表达.结果 细胞染色显示含药血清可明显抑制TRAP活性.在两组破骨分化模型外泌体...

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Published in中国骨质疏松杂志 Vol. 26; no. 11; pp. 1598 - 1603
Main Authors 唐彬彬, 刘康, 吴连国, 史晓林
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 浙江中医药大学附属第二医院骨科,浙江 杭州310005 2020
Subjects
β环状蛋白
破骨细胞
外泌体
成骨细胞
中医中药
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Summary:R-332; 目的 初步探究强骨饮调节破骨细胞来源外泌体影响成骨细胞分化的内在机制.方法 制备强骨饮含药血清,构建破骨分化和成骨分化模型.设置对照血清组和含药血清组,共同干预破骨细胞分化,找到最佳含药血清浓度.采用免疫印迹法检测两组细胞外泌体释放情况.将两组外泌体加入成骨分化模型中,采用化学发光法检测碱性磷酸酶(ALP)含量,采用实时荧光定量测量成骨特异性转录因子(Runx2)、骨桥蛋白(OPN)、骨钙素(OCN)表达情况.最后运用免疫印迹法检测强骨饮干预下破骨分化的β环状蛋白表达以及外泌体作用成骨分化的β环状蛋白表达.结果 细胞染色显示含药血清可明显抑制TRAP活性.在两组破骨分化模型外泌体中均表达CD9、CD63、CD81蛋白.在两组外泌体干预下,ALP、Runx2、OPN和OCN的表达较对照组均降低,但含药血清组中成骨因子表达较对照血清组增加.两组成骨分化模型在外泌体干预下β环状蛋白检测较对照组均减少,但含药血清组β环状蛋白较对照血清组增加.含药血清组破骨细胞检测β环状蛋白较对照血清组增加.结论 强骨饮可抑制破骨分化,改善破骨来源外泌体对成骨分化的抑制作用.破骨来源外泌体可能传递miRNA作用wnt/β-catenin通路,影响成骨细胞分化.
ISSN:1006-7108
DOI:10.3969/j.issn.1006-7108.2020.11.007