白菜型冬油菜BrADS2基因的克隆、表达分析与亚细胞定位

S565.2; [目的]探究白菜型冬油菜(Brassica rapa L.)脂肪酸去饱和酶ADS2(△9 fatty acid desaturase)基因与抗寒性的关系.[方法]基于前期转录组结果,采用一步定向克隆法得到BrADS2基因;构建GFP融合表达载体,通过注射法在烟草下表皮细胞进行瞬时转化,同时采用农杆菌侵染法侵染'中双11号';利用qRT-PCR技术,检测抗寒性不同的白菜型冬油菜品种叶片中ADS2基因的表达模式,并对低温下冬油菜的形态变化和抗氧化酶活性、电导率含量进行分析.[结果]白菜型冬油菜BrADS2基因可编码307个氨基酸,该基因编码的蛋白具有亲水性特性;...

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Published in西南农业学报 Vol. 37; no. 9; pp. 1978 - 1988
Main Authors 杨馥睿, 翟利佳, 刘自刚, 武泽峰, 崔俊美, 魏家萍, 王小霞, 巩永杰, 王莹, 方彦
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 甘肃农业大学农学院/甘肃农业大学干旱生境作物学国家重点实验室,兰州 730070 2024
Subjects
白菜型油菜
Brassica rapa
亚细胞定位
Subcellular localization
ADS2
表达特性
Expression characteristics
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ISSN1001-4829
DOI10.16213/j.cnki.scjas.2024.9.009

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Summary:S565.2; [目的]探究白菜型冬油菜(Brassica rapa L.)脂肪酸去饱和酶ADS2(△9 fatty acid desaturase)基因与抗寒性的关系.[方法]基于前期转录组结果,采用一步定向克隆法得到BrADS2基因;构建GFP融合表达载体,通过注射法在烟草下表皮细胞进行瞬时转化,同时采用农杆菌侵染法侵染'中双11号';利用qRT-PCR技术,检测抗寒性不同的白菜型冬油菜品种叶片中ADS2基因的表达模式,并对低温下冬油菜的形态变化和抗氧化酶活性、电导率含量进行分析.[结果]白菜型冬油菜BrADS2基因可编码307个氨基酸,该基因编码的蛋白具有亲水性特性;qRT-PCR结果显示,BrADS2基因的表达量呈先升后降的单峰型变化,且在-4℃时表达量达到峰值;亚细胞定位结果显示BrADS2蛋白在细胞质和细胞膜上表达;低温处理下3个品种叶片的相对电导率、抗氧化物酶活性均显著上升,强抗寒品种抗氧化酶活性高于弱抗寒品种,电导率却相反;农杆菌介导侵染'中双11号'下胚轴后获得15株转基因阳性苗,且转基因油菜阳性植株叶中的BrADS2基因表达量均显著高于野生型.[结论]推测BrADS2基因在白菜型冬油菜膜脂不饱和调节中起重要作用,揭示了 ADS2基因与冬油菜抗低温胁迫的关系.
ISSN:1001-4829
DOI:10.16213/j.cnki.scjas.2024.9.009