针刀治疗膝骨关节炎大鼠的转录组测序及实验验证

• Published in: 中国组织工程研究 Vol. 29; no. 20; pp. 4239 - 4248
• Main Authors: 刘彦彤, 王世轩, 赵双利, 魏巍, 王东海, 姜宗坤, 刘洪飞
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 辽宁中医药大学,辽宁省 沈阳市 110032%辽宁中医药大学附属第二医院,骨伤一科,,辽宁省 沈阳市 110034%辽宁中医药大学附属第二医院,骨伤四科,,辽宁省 沈阳市 110034%辽宁中医药大学附属第二医院,骨伤二科,辽宁省 沈阳市 110034 2025
• Subjects: 动物实验; osteoarthritis model; engineered tissue construction; 骨关节炎模型; 针刀; 内侧半月板韧带失稳术; 转录组测序; animal experiment; differential genes; 工程化组织构建; destabilization of the medial meniscus; transcriptome sequencing; acupotomy; knee osteoarthritis; 差异基因; experimental verification; 实验验证; 膝骨关节炎
• ISSN: 2095-4344
• DOI: 10.12307/2025.722

R459.9%R319%R245.3; 背景:针刀治疗膝骨关节炎临床疗效确切,但针刀干预膝骨关节炎在转录组水平上的调节机制仍未明确. 目的:通过针刀干预骨关节炎大鼠,对软骨样本进行转录组测序和生物信息学分析并加以验证,揭示针刀干预骨关节炎大鼠的作用机制. 方法:采用随机数字表法将48只SD大鼠随机分为针刀组、模型组和假手术组,每组16只.针刀组、模型组采用内侧半月板失稳术建立骨关节炎模型,造模6周后针刀组大鼠每周进行1次针刀治疗,共治疗4周.治疗4周后,对各组大鼠膝关节进行Micro CT扫描,对关节软骨进行苏木精-伊红染色、番红O-固绿染色及Mankin评分,采用Elisa法检测血清炎症因子水平,对软骨样本进行转录组测序,采用R软件进行差异基因生物信息学分析,采用蛋白互作网络和Cytoscape软件筛选核心靶点并进行RT-qPCR验证. 结果与结论:①相较于假手术组,模型组大鼠关节软骨表面粗糙不平、关节间隙狭窄,关节表层结构破坏,Mankin评分升高,血清白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、基质金属蛋白酶13水平显著上升(P<0.05);与模型组相比,针刀组大鼠关节软骨表面较为光滑,关节间隙增宽,关节表面轻微不规则,Mankin评分降低,血清白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、基质金属蛋白酶13水平显著降低(P<0.05).②基因本体论及京都基因组和基因组百科全书分析涉及蛋白分解代谢、自噬、丝裂原活化蛋白激酶、核因子kB及Wnt信号通路等,蛋白互作网络及Cytoscape筛选出共济失调毛细血管扩张突变、类Myb SWIRM和MPN结构域蛋白1、热休克蛋白90α1、NIPBL粘连蛋白负载因子4个关键基因.③模型组大鼠关节软骨中共济失调毛细血管扩张突变、类Myb SWIRM和MPN结构域蛋白1、热休克蛋白90α1、NIPBL粘连蛋白负载因子mRNA表达均低于假手术组(P<0.05),针刀组大鼠关节软骨中共济失调毛细血管扩张突变、类Myb SWIRM和MPN结构域蛋白1、热休克蛋白90α1、NIPBL粘连蛋白负载因子mRNA表达均高于模型组(P<0.05).④针刀干预可能作用于丝裂原活化蛋白激酶、核因子kB及Wnt等信号通路来促进软骨修复,并与共济失调毛细血管扩张突变、类Myb SWIRM和MPN结构域蛋白1、热休克蛋白90α1、NIPBL粘连蛋白负载因子基因的表达密切相关.