miR-144-3p参与高蛋氨酸饮食诱导Cbs+/-小鼠的肝细胞自噬

• Published in: 中国组织工程研究 Vol. 28; no. 8; pp. 1289 - 1294
• Main Authors: 盛思琪, 谢琳, 赵翔宇, 姜怡邓, 吴凯, 熊建团, 杨安宁, 郝银菊, 焦运
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 宁夏医科大学宁夏血管损伤与修复研究重点实验室,宁夏回族自治区 银川市 750004%宁夏医科大学基础医学院,宁夏回族自治区 银川市 750004 2024; 宁夏医科大学宁夏血管损伤与修复研究重点实验室,宁夏回族自治区 银川市 750004; 宁夏医科大学基础医学院,宁夏回族自治区 银川市 750004; 宁夏医科大学总医院,宁夏回族自治区 银川市 750004%宁夏医科大学国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室,宁夏回族自治区 银川市 750004; 宁夏医科大学国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室,宁夏回族自治区 银川市 750004; 宁夏医科大学总医院,宁夏回族自治区 银川市 750004
• Subjects: homocysteine; miR-144-3p; liver injury; 微小RNA; autophagy; 高蛋氨酸饮食; high-methionine diet; 同型半胱氨酸; microRNA; 肝损伤; 细胞自噬
• ISSN: 2095-4344
• DOI: 10.12307/2024.201

R459.9%R33%R97; 背景:高蛋氨酸饮食可导致Cbs+/-小鼠发生肝损伤,高同型半胱氨酸血症与肝脂肪变性、自身免疫性肝炎、酒精性脂肪肝等多种肝脏相关疾病的发生和进展有关.微小RNA(miRNAs)参与细胞存活、分化和细胞自噬等各种细胞过程,具有重要意义. 目的:探讨miR-144-3p在高蛋氨酸饮食诱导Cbs+/-小鼠肝细胞自噬中的关键作用. 方法:①选取4周龄体质量相近的雄性胱硫醚β-合成酶基因正常(Cbs+/+)小鼠和单基因敲除(Cbs+/-)小鼠各10只,均饲以高蛋氨酸饮食,12周后处死,留取肝脏组织.②体外培养人源肝细胞(HL-7702),分为对照组(0 μmol/L同型半胱氨酸)、同型半胱氨酸组(100 μmol/L同型半胱氨酸)、mimic-NC组(转染mimic-NC)、mimic-NC+同型半胱氨酸组(转染mimic-NC+100 μmol/L同型半胱氨酸)、miR-144-3p mimic组(转染miR-144-3p mimic)、miR-144-3p mimic+同型半胱氨酸组(转染miR-144-3p mimic+100 μmol/L同型半胱氨酸)、inhibitor-NC组(转染inhibitor-NC)、inhibitor-NC+同型半胱氨酸组(转染inhibitor-NC+100 μmol/L同型半胱氨酸)、miR-144-3p inhibitor组(转染miR-144-3p inhibitor)、miR-144-3p inhibitor+同型半胱氨酸组(转染miR-144-3p inhibitor+100 μmol/L同型半胱氨酸).采用荧光定量PCR检测肝组织和肝细胞中miR-144-3p的表达水平;转染miR-144-3p模拟物或抑制剂后,采用荧光定量PCR和Western blot分别检测miR-144-3p的转染效率及其对LC3B和p62蛋白表达的影响;酶联免疫法检测肝细胞上清液中丙氨酸氨基转移酶和门冬氨酸氨基转移酶的表达情况;Pearson相关性分析肝细胞miR-144-3p表达与肝细胞上清液中丙氨酸氨基转移酶和门冬氨酸氨基转移酶含量的相关性. 结果与结论:①与Cbs+/+组比较,Cbs+/-组小鼠肝组织和同型半胱氨酸组肝细胞中miR-144-3p的表达水平降低(P<0.01);②转染miR-144-3p模拟物后,与mimic-NC比较,miR-144-3p mi