血小板衍生生长因子BB诱导大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化

R459.9%R394.2%R683.42; 背景:研究表明,小鼠前破骨细胞分泌的血小板衍生生长因子BB可以促进成骨细胞和成血管细胞形成,尚无血小板衍生生长因子BB是否可以促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的相关研究.目的:探讨血小板衍生生长因子BB诱导大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的可行性.方法:①体外分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,第3代细胞经流式鉴定其表面标记物CD45、CD29和CD34的表达,选用纯度较高的骨髓间充质干细胞进行血小板衍生生长因子BB干预实验;②第3代骨髓间充质干细胞经25 μg/L血小板衍生生长因子BB诱导3d,进行Ⅰ型胶原免疫荧光染色,然后采用碱性磷酸酶改良钙...

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Published in中国组织工程研究 Vol. 25; no. 19; pp. 2953 - 2957
Main Authors 魏琴, 张雪, 马磊, 李志强, 寿玺, 段明军, 吴硕, 贾麒钰, 马创
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 新疆医科大学动物实验中心,新疆医学动物模型研究重点实验室,新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830011%新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院,新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830054%新疆医科大学第二附属医院骨科,新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830000%新疆医科大学第一附属医院骨科中心显微修复外科,新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830054 2021
Subjects
血小板衍生生长因子BB
钙结节
干细胞
成骨细胞
骨髓间充质干细胞
碱性磷酸酶
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ISSN2095-4344

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Summary:R459.9%R394.2%R683.42; 背景:研究表明,小鼠前破骨细胞分泌的血小板衍生生长因子BB可以促进成骨细胞和成血管细胞形成,尚无血小板衍生生长因子BB是否可以促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的相关研究.目的:探讨血小板衍生生长因子BB诱导大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的可行性.方法:①体外分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,第3代细胞经流式鉴定其表面标记物CD45、CD29和CD34的表达,选用纯度较高的骨髓间充质干细胞进行血小板衍生生长因子BB干预实验;②第3代骨髓间充质干细胞经25 μg/L血小板衍生生长因子BB诱导3d,进行Ⅰ型胶原免疫荧光染色,然后采用碱性磷酸酶改良钙钴法和偶氮偶联法、茜素红法对细胞进行染色,鉴定成骨细胞的表面特征,最后采用RT-PCR检测Runx-2和Gli-2的mRNA水平.结果 与结论:①经细胞免疫荧光染色,诱导后细胞的Ⅰ型胶原绿色荧光表达率＞90％;②经碱性磷酸酶改良钙钴法染色,可见细胞胞质中有黑色条索状附着,说明这些细胞均表达有活性的碱性磷酸酶;经碱性磷酸酶偶氮偶联法染色,可见细胞胞浆中含有蓝色的有活性的碱性磷酸酶;经茜素红染色,可见细胞聚集在一起形成小的红色的钙结节;③经RT-PCR检测,血小板衍生生长因子BB诱导后Gli-2和Runx-2的mRNA表达均高于未诱导骨髓间充质干细胞(P＜0.05);④结果表明,大鼠骨髓间充质干细胞经血小板衍生生长因子BB诱导后可以分化为具有功能的成骨细胞.
ISSN:2095-4344