罗汉果苷Ⅴ促进LncRNA TUG1表达刺激成骨细胞的增殖与分化

• Published in: 中国组织工程研究 Vol. 24; no. 26; pp. 4129 - 4134
• Main Authors: 姚顺晗, 韦华成, 覃家港, 廖亮
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 广西医科大学第一附属医院,广西壮族自治区南宁市,530021 2020
• Subjects: LncRNA TUG1; 骨质疏松; 细胞分化; 成骨细胞; 罗汉果苷; 细胞增殖
• ISSN: 2095-4344
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2735

R446%R496%R318; 背景:骨质疏松是骨在进行重塑的过程中,成骨细胞的骨形成和破骨细胞的骨吸收之间的动态平衡紊乱所致.在细胞水平严格控制骨重建,对于维持骨稳态和避免发生骨质疏松有重要意义.前期研究表明1.25x102 g/L的罗汉果苷Ⅴ可促进成骨细胞增殖、分化,其机制可能涉及LncRNA TUG1.目的:探讨LncRNA TUG1在罗汉果苷Ⅴ促进成骨细胞增殖与分化中的作用.方法:采用两步酶消化法提取SD乳鼠成骨细胞,随后将细胞分为2组,分别给予0,1.25× 10-2 g/L的罗汉果苷Ⅴ干预,干预培养2d后进行LncRNA基因检测;设计并合成LncRNA TUG1沉默病毒,将新提取的成骨细胞分为正常细胞对照组、罗汉果苷Ⅴ干预组、罗汉果苷Ⅴ+阴性病毒组、TUG1沉默组、罗汉果苷Ⅴ+TUG1沉默组.按实验分组对成骨细胞进行干预处理,随后分别在2,4,6d后通过FDA荧光染色观察成骨细胞增殖活性,干预6d后通过碱性磷酸酶染色、茜素红染色及qRT-PCR检测TUG1在罗汉果苷Ⅴ促进成骨细胞增殖与分化中的作用.结果 与结论:①LncRNA基因检测表明1.25x 10-2 g/L的罗汉果皂苷显著促进成骨细胞内LncRNA TUG1表达;②FDA荧光染色显示TUG1沉默可抑制罗汉果苷Ⅴ促进成骨细胞增殖;②干预6d后,碱性磷酸酶染色及茜素红染色实验均显示TUG1沉默可抑制罗汉果苷Ⅴ促进成骨细胞成骨矿化;③qRT-PCR结果显示成骨分化相关基因RUNX2、BSP、OCN和COL1A1在罗汉果苷Ⅴ干预组显著高表达,而在罗汉果苷Ⅴ干预+TUG1沉默组则表达受抑制;④以上结果表明,罗汉果苷Ⅴ通过促进LncRNA TUG1表达刺激成骨细胞的增殖与分化.