去端肽Ⅰ型胶原蛋白的免疫原性研究

R459.9%R318.08; 背景:Ⅰ型胶原蛋白的免疫原性主要分布在分子链的端肽区域,可在胶原蛋白提取过程中通过水解或是去除而使其失活,制备去端肽Ⅰ型胶原蛋白,降低其免疫原性.目的:评价去端肽Ⅰ型胶原蛋白的免疫原性.方法:采用酶切、盐析、透析工艺制备去端肽Ⅰ型胶原蛋白,通过考马斯亮蓝对牛血清白蛋白染色极限的分析,鉴定去端肽Ⅰ型胶原蛋白的纯度,依据YY/T 0606.25-2014中规定的方法,利用Quant-IT PicoGreen dsDNA Reagent and Kits试剂盒测定去端肽Ⅰ型胶原蛋白的DNA残留量,利用ELISA试剂盒分析去端肽Ⅰ 型胶原蛋白的端肽去除效果,依据YY/T...

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Published in中国组织工程研究 Vol. 23; no. 22; pp. 3542 - 3548
Main Authors 张自强, 张以河, 安琪, 徐荣荣, 李欢, 王恩博
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 非金属矿物与固废资源材料化利用北京市重点实验室,中国地质大学(北京)材料科学与工程学院,北京市 102200%北京湃生生物科技有限公司,北京市,102200%北京大学口腔医学院口腔颌面外科,北京市,100081 2019
Subjects
端肽
去端肽胶原蛋白
α-Gal抗原
胶原纯度
型胶原蛋白
DNA残留量
免疫原性
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ISSN2095-4344
DOI10.3969/j.issn.2095-4344.1738

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Summary:R459.9%R318.08; 背景:Ⅰ型胶原蛋白的免疫原性主要分布在分子链的端肽区域,可在胶原蛋白提取过程中通过水解或是去除而使其失活,制备去端肽Ⅰ型胶原蛋白,降低其免疫原性.目的:评价去端肽Ⅰ型胶原蛋白的免疫原性.方法:采用酶切、盐析、透析工艺制备去端肽Ⅰ型胶原蛋白,通过考马斯亮蓝对牛血清白蛋白染色极限的分析,鉴定去端肽Ⅰ型胶原蛋白的纯度,依据YY/T 0606.25-2014中规定的方法,利用Quant-IT PicoGreen dsDNA Reagent and Kits试剂盒测定去端肽Ⅰ型胶原蛋白的DNA残留量,利用ELISA试剂盒分析去端肽Ⅰ 型胶原蛋白的端肽去除效果,依据YY/T 1561-2017标准检测去端肽Ⅰ型胶原蛋白的α-Gal抗原含量.结果与结论:去端肽Ⅰ型胶原蛋白的纯度可达99.8％,DNA残留量为4μg/g,C、N末端肽浓度低于试剂盒检测限,α-Gal抗原含量低于检测限.通过酶切、盐析、透析工艺制备的去端肽Ⅰ型胶原蛋白,可显著去除天然胶原蛋白的免疫原性根源,有效控制胶原蛋白临床应用的免疫原性风险.
ISSN:2095-4344
DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.1738