新基因Clorf63功能的初步研究

R735.7%735.2; 目的 检测Clorf63基因在肝癌和癌旁组织中的定位,以及Clorf63在多种人肝癌细胞系和人胃癌细胞系中的mRNA和蛋白表达水平；检测干涉Clorf63后对人胃癌细胞MKN28的细胞周期的影响.方法 免疫组化染色法检测Clorf63基因在组织中的定位；Real-time PCR和Western blot分别检测Clorf63基因在细胞中的表达；脂质体转染法将干涉片段转染至MKN28细胞中,Real-time PCR和Western blot法筛选有效干涉片段；流式细胞术检测Clorf63干涉后对MKN28细胞的细胞周期的影响.结果 Clorf63在肝癌和癌旁组织细...

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Published in西安交通大学学报（医学版） Vol. 32; no. 5; pp. 531 - 535
Main Authors 何颖, 郝强, 李维娜, 舒震, 张阔, 金亮亮, 张伟, 张英起
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 第四军医大学药学院生物制药教研室,陕西西安,710032 2011
Subjects
细胞周期
RNAi
MKN28
Clorf63基因
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Summary:R735.7%735.2; 目的 检测Clorf63基因在肝癌和癌旁组织中的定位,以及Clorf63在多种人肝癌细胞系和人胃癌细胞系中的mRNA和蛋白表达水平；检测干涉Clorf63后对人胃癌细胞MKN28的细胞周期的影响.方法 免疫组化染色法检测Clorf63基因在组织中的定位；Real-time PCR和Western blot分别检测Clorf63基因在细胞中的表达；脂质体转染法将干涉片段转染至MKN28细胞中,Real-time PCR和Western blot法筛选有效干涉片段；流式细胞术检测Clorf63干涉后对MKN28细胞的细胞周期的影响.结果 Clorf63在肝癌和癌旁组织细胞中都有胞浆表达,在MKN28细胞中表达量较高,在MKN45细胞中表达量较低；成功筛选出Clorf63基因的有效干涉片段；Clorf63干涉后,胃癌细胞MKN28发生G1期阻滞,经统计学分析,Clorf63干涉后MKN28细胞增殖指数降低(P＜0.05).结论 Clorf63在人肝癌和癌旁组织细胞胞浆中都有表达,在MKN28细胞中表达量最高；干涉Clorf63基因后,可使MKN28细胞发生G1期阻滞,为该基因功能的后续研究奠定了基础.
ISSN:1671-8259