对比剂诱导巨噬细胞来源外泌体对肾小管上皮细胞的作用及甘草酸苷的干预效应

R692; 目的 探讨对比剂诱导巨噬细胞来源外泌体对肾小管上皮细胞的作用及甘草酸苷的干预效应.方法 分别用PBS、碘海醇、碘海醇+甘草酸苷刺激THP-1细胞,获取3种外泌体(NC-Exo、CIN-Exo、CIN-GL-Exo).透射电镜观察外泌体的形态;蛋白免疫印迹(Western blot)检测CD63、TSG101、calnexin的表达;荧光标记法检测外泌体的摄取.将HK-2细胞随机分为4组:Con组、NC-Exo组、CIN-Exo组、CIN-GL-Exo组.Western blot检测3种外泌体中高迁移率族蛋白1(HMGB1)表达量,以及4组细胞中凋亡相关蛋白及HMGB1/Toll样受...

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Published in天津医药 Vol. 48; no. 12; pp. 1153 - 1158
Main Authors 韩崇明, 张莹莹, 徐兆龙
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 锦州医科大学附属第一医院心内科 121000%锦州医科大学研究生院 2020
Subjects
细胞凋亡
外泌体
对比剂肾病
巨噬细胞
HMGB1蛋白质
甘草酸苷
肾小管上皮细胞
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Summary:R692; 目的 探讨对比剂诱导巨噬细胞来源外泌体对肾小管上皮细胞的作用及甘草酸苷的干预效应.方法 分别用PBS、碘海醇、碘海醇+甘草酸苷刺激THP-1细胞,获取3种外泌体(NC-Exo、CIN-Exo、CIN-GL-Exo).透射电镜观察外泌体的形态;蛋白免疫印迹(Western blot)检测CD63、TSG101、calnexin的表达;荧光标记法检测外泌体的摄取.将HK-2细胞随机分为4组:Con组、NC-Exo组、CIN-Exo组、CIN-GL-Exo组.Western blot检测3种外泌体中高迁移率族蛋白1(HMGB1)表达量,以及4组细胞中凋亡相关蛋白及HMGB1/Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)信号通路相关蛋白的表达;AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测4组细胞的凋亡率;实时荧光定量PCR检测4组细胞炎性因子[白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α]mRNA的表达.结果 THP-1细胞来源的外泌体为圆形或类圆形小囊泡,表达标志物蛋白CD63、TSG101,而不表达内质网蛋白calnexin.标记DiR荧光素的外泌体可被HK-2细胞摄取.CIN-Exo中HMGB1表达量高于NC-Exo和CIN-GL-Exo(P<0.05).CIN-Exo组的细胞凋亡率以及Bax、Cleaved caspase-3表达量高于Con组、NC-Exo组、CIN-GL-Exo组,而Bcl-2表达量低于其他3组(P<0.05).CIN-Exo组细胞中IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA水平,以及HMGB1、TLR4、NF-κB表达量高于其他3组(P<0.05).结论 对比剂可通过巨噬细胞来源外泌体诱导肾小管上皮细胞凋亡和炎症反应,可能与外泌体HMGB1水平上调有关,甘草酸苷可抑制该途径而发挥保护效应.
ISSN:0253-9896
DOI:10.11958/20201413