ZNF407通过TGF-β/Smad信号通路抑制皮肤黑色素瘤迁移与侵袭的影响

• Published in: 中国美容整形外科杂志 Vol. 35; no. 8; pp. 477 - 482
• Main Authors: 李晶, 余音, 刘素桃, 黎智, 王雨晴, 王灿
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 重庆市中医院(重庆市中西医结合医院、重庆市中医研究院、重庆市第一人民医院)皮肤科,重庆 400011%重庆大学附属肿瘤医院 肿瘤转移与个体化诊治转化研究重庆市重点实验室,重庆 400030 2024
• Subjects: TGF-β/Smad; 迁移和侵袭; Migration and invation; ZNF407; Melanoma; 基因表达; Gene expression; 黑色素瘤
• ISSN: 1673-7040
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-7040.2024.08.007

目的 探讨锌指蛋白ZNF407在黑色素瘤(melanoma)中的表达和功能,及对黑色素瘤迁移与侵袭的影响和作用机制.方法 自2015年 1 月至 2021 年 1 月,收集重庆市中医院皮肤科的黑色素瘤临床样本 42 例和 20 例正常色素痣组织,以黑色素瘤组织和细胞系为研究对象,通过免疫蛋白印迹实验和实时荧光PCR检测ZNF407 在黑色素瘤组织中相对表达,实时荧光PCR检测ZNF407 在黑色素瘤细胞系中相对表达;Pearson相关性检测分析ZNF407 与TGF-β1 在黑色素瘤中的表达相关性;以黑色素瘤细胞系A375细胞为研究对象进行ZNF407基因过表达,分别转染pcDNA3.1(+)-Flag-ZNF407(实验组)和pcDNA3.1(+)-Flag-Vector(对照组),未转染为空白对照组.Transwell实验验证实验组和对照组中A375 细胞迁移和侵袭的影响;半定量PCR和实时荧光PCR检测ZNF407 对细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关mRNA表达水平的影响,免疫蛋白印迹实验检测ZNF407 对EMT相关蛋白表达水平的影响;免疫蛋白印迹实验检测ZNF407 对TGF-β信号通路的影响.结果 免疫蛋白印迹实验和实时荧光PCR显示:与色素痣细胞组织相比,ZNF407蛋白和mRNA在黑色素瘤组织中表达下调(P<0.001);实时荧光PCR显示:与正常色素痣细胞相比,ZNF407 mRNA在黑色素瘤细胞中表达下调(P<0.001).Transwell迁移实验显示:与对照组相比,实验组穿出小室细胞数(116±17)低于对照组(265±27,P<0.01)和空白对照组细胞(259±28,P<0.01);侵袭实验显示:实验组穿出小室细胞数(82±14)低于对照组(215±31,P<0.01)和空白对照组细胞(209±32,P<0.01).免疫蛋白印迹实验显示:过表达ZNF407 后,实验组Vimentin、N-cadherin、Twist和MMP7的蛋白表达下调;E-cadherin的蛋白表达上调(P＜0.001);半定量PCR和实时荧光PCR显示:过表达ZNF407后,实验组中干细胞标记物ABCG2、Snail2和OCT4 mRNA表达下调(P＜0.001).Pearson相关性分析显示:黑色素瘤组织中ZNF407 mRNA与TGF-β1