免疫磁珠结合PCR-试纸条法鉴定金枪鱼成分的研究

目的 建立一种免疫磁珠结合PCR-免疫金标试纸条快速检测金枪鱼成分的方法.方法 使用免疫磁珠法提取金枪鱼样品的核酸,针对金枪鱼基因组特异性基因片段设计引物,优化反应体系和反应条件,建立金枪鱼成分PCR产物试纸条检测方法,验证方法的特异性、灵敏度和稳定性,并对市售金枪鱼产品进行检测.结果 免疫磁珠法提取市售金枪鱼样品DNA的纯度高.所建立的PCR-试纸条方法特异性强,仅金枪鱼能扩增出229 bp特异性DNA片段,试纸条检测线变红,其他鱼类均无非特异性扩增条带,试纸条检测线未变红色;灵敏度高,达到0.01％;方法 快速,PCR产物的试纸条判读时间5 min.结论 该方法具有特异性强、灵敏度高、稳定...

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Published in食品安全质量检测学报 Vol. 12; no. 13; pp. 5260 - 5265
Main Authors 赵良娟, 邢冉冉, 庞璐, 刘亚华, 刘金玉, 郑文杰
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 天津海关动植物与食品检测中心, 天津 300461%中国检验检疫科学研究院, 北京 100176%天津师范大学, 天津市动植物抗性重点实验室, 天津 300387 2021
Subjects
免疫磁珠
金枪鱼成分
PCR-试纸条
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Summary:目的 建立一种免疫磁珠结合PCR-免疫金标试纸条快速检测金枪鱼成分的方法.方法 使用免疫磁珠法提取金枪鱼样品的核酸,针对金枪鱼基因组特异性基因片段设计引物,优化反应体系和反应条件,建立金枪鱼成分PCR产物试纸条检测方法,验证方法的特异性、灵敏度和稳定性,并对市售金枪鱼产品进行检测.结果 免疫磁珠法提取市售金枪鱼样品DNA的纯度高.所建立的PCR-试纸条方法特异性强,仅金枪鱼能扩增出229 bp特异性DNA片段,试纸条检测线变红,其他鱼类均无非特异性扩增条带,试纸条检测线未变红色;灵敏度高,达到0.01％;方法 快速,PCR产物的试纸条判读时间5 min.结论 该方法具有特异性强、灵敏度高、稳定性好、简便环保等优点,适用于金枪鱼成分的快速检测.
ISSN:2095-0381