定量PCR技术检测杀菌型产品中乳酸菌

目的 利用定量PCR(quantitative PCR,qPCR)技术检测杀菌型产品中乳酸菌,并与标签标示相比较,查探产品中各类菌种的异同性及数量.方法 以市售的发酵乳及含乳饮料作为研究对象,设计可区分产品中常见的6种乳酸菌特异性引物及探针,利用qPCR技术对方法的特异性、灵敏度进行验证,并建立标准扩增曲线;利用模拟样品对方法进行检验,最后对市场上购买的实际样品进行检测.结果 除去干酪乳杆菌,其他5种引物都能特异性扩增出其目标菌,并且对其他的乳酸菌均无扩增现象;DNA检测的灵敏度可达到2～4 pg;单一标准菌种扩增曲线线性较好,相关系数r2值在0.954～0.992之间;对模拟样品的检测,与平...

Full description

Saved in:
Bibliographic Details
Published in食品安全质量检测学报 Vol. 11; no. 13; pp. 4507 - 4513
Main Authors 俞漪, 顾晨荣, 张娜娜, 刘洋, 徐琼
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 上海市质量监督检验技术研究院/国家食品质量监督检验中心(上海),上海,200233 2020
Subjects
非培养
定量PCR
乳酸菌
杀菌型产品
Online AccessGet full text

Cover

More Information
Summary:目的 利用定量PCR(quantitative PCR,qPCR)技术检测杀菌型产品中乳酸菌,并与标签标示相比较,查探产品中各类菌种的异同性及数量.方法 以市售的发酵乳及含乳饮料作为研究对象,设计可区分产品中常见的6种乳酸菌特异性引物及探针,利用qPCR技术对方法的特异性、灵敏度进行验证,并建立标准扩增曲线;利用模拟样品对方法进行检验,最后对市场上购买的实际样品进行检测.结果 除去干酪乳杆菌,其他5种引物都能特异性扩增出其目标菌,并且对其他的乳酸菌均无扩增现象;DNA检测的灵敏度可达到2～4 pg;单一标准菌种扩增曲线线性较好,相关系数r2值在0.954～0.992之间;对模拟样品的检测,与平板法差异性比较,P值均大于0.05,无显著性差异.对市售样品进行检测,产品中标记的干酪乳杆菌、双歧杆菌和嗜热链球菌与检测结果存在不匹配现象.结论 本研究建立的qPCR方法可快速、准确地对产品中德氏乳杆菌保加利亚亚种、嗜热链球菌、乳酸乳球菌、嗜酸乳杆菌、双歧杆菌的鉴定和定量的分析.
ISSN:2095-0381