多柔比星对心肌细胞焦亡及Caspase-3/GSDME信号通路的影响

R979.1; 目的 观察多柔比星(Dox)对心肌细胞焦亡及Caspase-3/焦孔素E(GSDME)信号通路的影响.方法 将大鼠心肌细胞H9c2分为4组,空白对照组加入培养基;Dox组加入4μmol/L Dox处理8 h;GSDME转染对照组转染GSDME siRNA对照无干扰序列,GSDME干扰组转染GSDME siRNA,24 h后加入Dox培养8 h.采用碘化丙啶(PI)染色法观察细胞焦亡情况(PI阳性细胞率),分别用比色法、ELISA法检测细胞损伤后释放入上清液中的乳酸脱氢酶(LDH)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18,Western blotting法检测Caspase-3...

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Published in山东医药 Vol. 61; no. 5; pp. 22 - 25
Main Authors 张蕊, 蒋磊, 王志贤
Format Magazine Article
LanguageChinese
Published 安徽省第二人民医院,合肥230041 2021
Subjects
多柔比星
细胞焦亡
焦孔素E
信号通路
心肌细胞
Caspase-3
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ISSN1002-266X
DOI10.3969/j.issn.1002-266X.2021.05.006

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Summary:R979.1; 目的 观察多柔比星(Dox)对心肌细胞焦亡及Caspase-3/焦孔素E(GSDME)信号通路的影响.方法 将大鼠心肌细胞H9c2分为4组,空白对照组加入培养基;Dox组加入4μmol/L Dox处理8 h;GSDME转染对照组转染GSDME siRNA对照无干扰序列,GSDME干扰组转染GSDME siRNA,24 h后加入Dox培养8 h.采用碘化丙啶(PI)染色法观察细胞焦亡情况(PI阳性细胞率),分别用比色法、ELISA法检测细胞损伤后释放入上清液中的乳酸脱氢酶(LDH)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18,Western blotting法检测Caspase-3/GSDME信号通路相关蛋白Cleaved Caspase-3、GSDME-N(GSDME被Cleaved Caspase-3剪切形成具有细胞成孔作用的片段)及炎症相关蛋白IL-1β、IL-18.结果 与空白对照组比较,Dox组、GSDME转染对照组PI阳性细胞率增高,细胞中LDH、IL-1β、IL-18释放量增高,细胞Cleaved Caspase-3、GSDME-N、IL-1β、IL-18蛋白表达增高(P均<0.05).与Dox组比较,GSDME干扰组PI阳性细胞率及细胞中LDH、IL-1β、IL-18释放量和GSDME-N蛋白表达降低(P均<0.05),GSDME转染对照组各指标差异无统计学意义.结论 Dox可以通过激活Caspase-3/GSDME信号通路诱导心肌细胞焦亡,导致心肌损伤.
ISSN:1002-266X
DOI:10.3969/j.issn.1002-266X.2021.05.006