Tandab(CD3/CD19)与CD19+、CD3+血液病细胞结合力及对PBMC的CD19+血液病细胞杀伤力观察

R318%R733; 目的 观察串联四价双特异性抗体Tandab(CD3/CD19)与CD19+、CD3+血液病细胞结合力及对外周血单个核细胞(PBMC)的CD19+血液病细胞杀伤力.方法 采用PCR、overlap PCR、酶切、连接等方法构建慢病毒表达载体pLentiR.SV40-Tandab(CD3/CD19),用pLentiR.SV40-Tandab(CD3/CD19)瞬时转染293T细胞,提取并纯化Tandab(CD3/CD19).采用FACS法检测Tandab(CD3/CD19)与CD19+(Raji、Daudi、B JAB)、CD3+ (Jurkat)血液病细胞的直接结合力,检测...

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Published in山东医药 Vol. 58; no. 15; pp. 21 - 24
Main Authors 魏中琴, 张晓龙, 杨圆圆, 卢杨, 林芳珍, 张砚君
Format Magazine Article
LanguageChinese
Published 中国医学科学院北京协和医学院血液病医院,天津,300020 2018
Subjects
双特异性抗体
靶向杀伤作用
串联四价双特异性抗体CD3/CD19
串联四价双特异性抗体
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ISSN1002-266X
DOI10.3969/j.issn.1002-266X.2018.15.006

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Summary:R318%R733; 目的 观察串联四价双特异性抗体Tandab(CD3/CD19)与CD19+、CD3+血液病细胞结合力及对外周血单个核细胞(PBMC)的CD19+血液病细胞杀伤力.方法 采用PCR、overlap PCR、酶切、连接等方法构建慢病毒表达载体pLentiR.SV40-Tandab(CD3/CD19),用pLentiR.SV40-Tandab(CD3/CD19)瞬时转染293T细胞,提取并纯化Tandab(CD3/CD19).采用FACS法检测Tandab(CD3/CD19)与CD19+(Raji、Daudi、B JAB)、CD3+ (Jurkat)血液病细胞的直接结合力,检测Tandab(CD3/CD19)和抗CD19单克隆抗体HIT19a(或抗CD3单克隆抗体HIT3a)对CD19+、CD3+血液病细胞的竞争结合力.采用乳酸脱氢酶释放法观察Tandab(CD3/CD19)对外周血单个核细胞(PBMC) CD19+血液病细胞杀伤力(以细胞毒性百分比表示)的影响.结果 Tandab(CD3/CD19)可与Raji、Daudi、BJAB、Jurkat直接结合,也可与HIT19a(或HIT3a)竞争性结合Raji、Daudi、BJAB、Jurkat.随Tandab(CD3/CD19)浓度增加,PBMC细胞对Raji、Daudi、BJAB细胞的细胞毒性百分比增加,呈剂量依赖性(P均＜0.05).结论 Tandab(CD3/CD19)与CD19+、CD3+血液病细胞具有直接结合力和竞争结合力,并可促进PBMC对CD19+血液病细胞的杀伤力.
ISSN:1002-266X
DOI:10.3969/j.issn.1002-266X.2018.15.006