牛磺酸对乳房链球菌感染引起的氧化应激影响及其机制

S852.23; [目的]本文旨在探究牛磺酸对乳房链球菌(Streptococcus uberis)感染引起的氧化应激反应的影响及机制.[方法]用70 mmol·L-1牛磺酸(taurine)处理牛乳腺上皮细胞(MAC-T)4 h,加入S.uberis[感染复数(MOI)=10]继续培养3 h,收集细胞;用靶向siRNA干扰牛磺酸的2个转运载体(TauT、PAT1)的表达,再用70 mmol·L-1牛磺酸处理4 h,收集样品.通过Western blot、流式细胞术、试剂盒(ABTS法、TBA法、WST-1法、钼酸铵法等)、免疫荧光等方法,检测Keap1和Nrf2蛋白的表达,活性氧(ROS)和...

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Published in南京农业大学学报 Vol. 42; no. 3; pp. 491 - 498
Main Authors 王正磊, 周艺琳, 周美意, 董心仪, 臧琦铭, PHOUTHAPANE Vanhnaseng, 苗晋锋
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 南京农业大学动物医学院,江苏 南京,210095%老挝科技部生态与生物技术研究所,老挝 万象01000 2019
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Summary:S852.23; [目的]本文旨在探究牛磺酸对乳房链球菌(Streptococcus uberis)感染引起的氧化应激反应的影响及机制.[方法]用70 mmol·L-1牛磺酸(taurine)处理牛乳腺上皮细胞(MAC-T)4 h,加入S.uberis[感染复数(MOI)=10]继续培养3 h,收集细胞;用靶向siRNA干扰牛磺酸的2个转运载体(TauT、PAT1)的表达,再用70 mmol·L-1牛磺酸处理4 h,收集样品.通过Western blot、流式细胞术、试剂盒(ABTS法、TBA法、WST-1法、钼酸铵法等)、免疫荧光等方法,检测Keap1和Nrf2蛋白的表达,活性氧(ROS)和细胞内总抗氧化能力(T-AOC)水平,丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性及Nrf2蛋白在细胞中的定位.[结果]S.uberis感染能够显著降低T-AOC水平及提高MDA和ROS含量,使SOD和CAT活性显著提高(P<0.05).与S.uberis感染组相比,牛磺酸预处理后感染细菌显著提高胞内T-AOC水平及SOD和CAT活性,降低MDA和ROS含量,并抑制Keap1的表达,促进Nrf2的表达及入核(P<0.05);抑制牛磺酸转运载体TauT、PAT1的表达后,Keap1的降低及Nrf2的升高被显著抑制(P<0.05).[结论]牛磺酸可能通过转运载体TauT、PAT1进入乳腺上皮细胞,并通过激活Keap1-Nrf2信号通路缓解S.uberis感染引起的氧化应激反应.
ISSN:1000-2030
DOI:10.7685/jnau.201812007