基于环介导等温扩增技术的巴戟天检测方法的建立

R927.1%R349.82; 目的 建立一种可快速检测中药巴戟天的环介导等温扩增(LAMP)检测方法.方法 针对巴戟天二级内部转录空间(ITS2)序列设计LAMP特异引物组,提取DNA后建立基于LAMP技术鉴别巴戟天的目视和实时定量检测方法,同时评估该方法的特异性、灵敏度及其在实践中的应用情况.结果 该检测方法具有良好的特异性,最适反应温度为63℃,灵敏度约为0.10μg/L,比常规聚合酶链式反应(PCR)方法约高10倍.经验证可成功从7种近缘物种中检测出巴戟天.结论 巴戟天LAMP检测是一种简便、客观、灵敏、快速的方法,值得进一步推广应用....

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Published in精准医学杂志 Vol. 36; no. 3; pp. 217 - 221
Main Authors 王姝涵, 隋爱华, 韩亚斐, 周泉, 许行, 姚如永
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 青岛大学附属医院医学研究中心,山东 青岛 266003 2021
Subjects
温度
中药鉴定
DNA,植物
ITS2序列
巴戟天
环介导等温扩增
核酸扩增技术
敏感性与特异性
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Summary:R927.1%R349.82; 目的 建立一种可快速检测中药巴戟天的环介导等温扩增(LAMP)检测方法.方法 针对巴戟天二级内部转录空间(ITS2)序列设计LAMP特异引物组,提取DNA后建立基于LAMP技术鉴别巴戟天的目视和实时定量检测方法,同时评估该方法的特异性、灵敏度及其在实践中的应用情况.结果 该检测方法具有良好的特异性,最适反应温度为63℃,灵敏度约为0.10μg/L,比常规聚合酶链式反应(PCR)方法约高10倍.经验证可成功从7种近缘物种中检测出巴戟天.结论 巴戟天LAMP检测是一种简便、客观、灵敏、快速的方法,值得进一步推广应用.
ISSN:2096-529X
DOI:10.13362/j.jpmed.202103007