噬菌体展示禽流感病毒抗原变异性基因片段文库的构建

• Published in: 吉林大学学报（理学版） Vol. 57; no. 4; pp. 989 - 996
• Main Authors: 田栢会, 易乐, 王习文, 李颂, 付世杰, 王雨田, 曲晗, 李志萍, 王丽萍, 张淑华, 夏志平
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所,长春130122%中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130122%吉林大学生命科学学院,长春,130012%长春理工大学生命科学技术学院,长春,130022 2019; 长春理工大学生命科学技术学院,长春130022
• Subjects: 禽流感病毒; 文库鉴定; 抗原变异性基因; T7噬菌体; 噬菌体展示
• ISSN: 1671-5489
• DOI: 10.13413/j.cnki.jdxblxb.2018460

Q819; 构建T7噬菌体展示禽流感病毒抗原变异性基因片段文库.首先,从Gene Bank中查找筛选禽流感病毒抗原变异性基因,将其截短、修饰、简并后得到禽流感病毒抗原变异性基因微阵列.其次,将合成的禽流感病毒抗原变异性基因片段文库扩增、酶切,链接到双酶切后的T7噬菌体载体基因上,构成重组噬菌体DNA.最后,重组噬菌体DNA经体外包装和扩增,得到T7噬菌体展示文库,并进行T7噬菌体展示文库滴度、重组率和免疫活性测定.实验结果表明,从Gene Bank中查找、筛选、剪切和修饰共获得96 258条序列构建T7噬菌体展示文库,原始文库滴度为3.6×107个菌落/mL,重组率大于90％.用禽流感病毒H5N1抗体进行捕获,经聚合酶链式反应(PCR)鉴定,得到理想目的条带,证明噬菌体表面展示蛋白具有抗原活性,可用于禽流感病毒感染患者的快速检测及抗原表位筛选.