448nm蓝光照射致ARPE-19细胞坏死性凋亡研究

Q28; 长期超风险限值蓝光照射可能导致视网膜变性疾病,而视网膜色素上皮损伤是视网膜光损伤的关键来源.本研究探讨了448 nm蓝光对人视网膜色素上皮细胞的损伤作用及凋亡方式.25 mW/cm2蓝光照射ARPE-19细胞3、6、9、12 h,照后即刻采用钙黄绿素乙酰甲酯染色检测细胞活性,并在照后24 h采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测坏死性凋亡相关基因表达,同时采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测坏死性凋亡和DNA损伤标志蛋白表达.9 h和12 h照射组细胞形态发生显著变化,表现为细胞肿胀、间隙增大、漂浮细胞增多、细胞碎片增加;蓝光照射3～9 h后RIPK1、RIPK...

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Published in激光生物学报 Vol. 32; no. 1; pp. 36 - 54
Main Authors 马琼, 徐天池, 康宏向
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所,北京 100850%中国人民解放军军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所,北京 100850 2023
河北大学生命科学学院,保定 071000
Subjects
DNA损伤
光化学损伤
ARPE-19细胞
坏死性凋亡
蓝光
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ISSN1007-7146
DOI10.3969/j.issn.1007-7146.2023.01.006

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Summary:Q28; 长期超风险限值蓝光照射可能导致视网膜变性疾病,而视网膜色素上皮损伤是视网膜光损伤的关键来源.本研究探讨了448 nm蓝光对人视网膜色素上皮细胞的损伤作用及凋亡方式.25 mW/cm2蓝光照射ARPE-19细胞3、6、9、12 h,照后即刻采用钙黄绿素乙酰甲酯染色检测细胞活性,并在照后24 h采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测坏死性凋亡相关基因表达,同时采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测坏死性凋亡和DNA损伤标志蛋白表达.9 h和12 h照射组细胞形态发生显著变化,表现为细胞肿胀、间隙增大、漂浮细胞增多、细胞碎片增加;蓝光照射3～9 h后RIPK1、RIPK3 mRNA表达量较正常组出现明显升高,且在照射9 h时达到最大值;蓝光照射6～12 h后RIPK1、RIPK3、P-MLKL坏死性凋亡蛋白标志物的表达量随蓝光照射时间增加而明显升高,并在照射12 h时达到最高值;蓝光照射3～12 h后DNA损伤标志物γ-H2AX蛋白表达量明显升高,并在照射12 h时达到最高值.蓝光照射9 h坏死性凋亡相关基因表达量达到最大,照射12 h基因表达明显下降但坏死性凋亡相关蛋白表达量累积到最大,这提示25 mW/cm2蓝光照射9～12 h可诱导ARPE-19细胞发生坏死性凋亡,并表明DNA损伤程度与细胞坏死性凋亡发生可能存在关联.
ISSN:1007-7146
DOI:10.3969/j.issn.1007-7146.2023.01.006