甜菜碱抑制ABCB1逆转前列腺癌化疗耐药的作用及其机制

• Published in: 解放军医学杂志 Vol. 50; no. 2; pp. 197 - 206
• Main Authors: 李亚杰, 张航, 聂黎虹, 安康杰, 杨尉鑫, 田国林, 赵瑞宁
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 宁夏回族自治区人民医院泌尿外科,宁夏 银川 750001 2025; 宁夏医科大学总医院泌尿外科,宁夏 银川 750001%宁夏医科大学总医院泌尿外科,宁夏 银川 750001; 巴中市中心医院泌尿外科,四川 巴中 636000%宁夏医科大学基础医学院,宁夏 银川 750001%宁夏医科大学总医院泌尿外科,宁夏 银川 750001
• Subjects: 前列腺癌; chemotherapy resistance; prostate cancer; ABCB1; 甜菜碱; betaine; 化疗耐药
• ISSN: 0577-7402
• DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.1176.2024.0508

R737.25; 目的 探讨甜菜碱(BET)抑制ATP结合盒转运蛋白B1(ABCB1)逆转前列腺癌(PCa)化疗耐药的作用及其机制.方法 培养PCa化疗敏感株C4-2B细胞,通过多西他赛(DTX)浓度梯度递增法建立PCa对DTX耐药株TaxR细胞,采用CCK-8法和集落形成实验检测C4-2B、TaxR细胞对DTX的耐药性,Western blotting、qRT-PCR检测ABCB1的表达情况.将TaxR细胞分为:(1)对照组、阴性对照组、siABCB1-1组与siABCB1-2组,采用Western blotting检测小干扰沉默ABCB1的效果,CCK-8法检测各组对DTX耐药性的差异;(2)不同浓度BET(0、100、200、400、600、800 mmol/L)组,采用CCK-8法检测细胞活性,Western blotting检测ABCB1 蛋白的表达情况;(3)对照组、DTX组(20 nmol/L DTX处理)、BET组(200 mmol/L BET处理)与DTX+BET组(20 nmol/L DTX+200 mmol/L BET联合处理),采用流式细胞术检测细胞凋亡率、细胞周期,Western blotting检测凋亡相关蛋白(Bcl-2、BAX、c-caspase-3)的表达情况;(4)对照组、BET组(200 mmol/L BET处理)、渥曼青霉素(WM)组(100 μmol/L WM处理)与BET+WM组(200 mmol/L BET+100 μmol/L WM联合处理),采用Western blotting检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)及ABCB1蛋白的表达情况;(5)对照组、BAY组(10 μmol/L BAY处理)、BET组(200 mmol/L BET处理)与BAY+BET组(10 μmol/L BAY+200 mmol/L BET联合处理),采用Western blotting检测NF-κB p65、p-ikBα和ABCB1蛋白的表达情况.利用网络药理学联合转录组测序相关研究结果预测BET逆转化疗耐药的可能通路.结果 与C4-2B细胞相比,TaxR细胞对DTX的耐药性明显增强(P<0.01),且高表达ABCB1(P<0.01).siRNA沉默ABCB1后TaxR对DTX的耐药性被明显抑制(P<0.01).200 mmol/L BET对TaxR细胞的抑制率低于2