远志皂苷元缓解脂多糖诱导的小鼠小胶质细胞炎症反应的机制

• Published in: 解放军医学杂志 Vol. 50; no. 2; pp. 188 - 196
• Main Authors: 穆秉桃, 郭敏芳, 于婧文, 曹佳蕾, 杨凤君, 贾思玮, 苏琴, 孟涛, 马存根, 尉杰忠, 宋丽娟
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 大同市第五人民医院神经内科,山西 大同 037009 2025; 山西大同大学脑科学研究所/分子细胞免疫学大同市重点实验室,山西 大同 037009%山西大同大学医学院,山西 大同 037009%山西中医药大学国家中医药管理局多发性硬化益气活血重点研究室/神经生物学研究中心,山西 晋中 030619%山西大同大学脑科学研究所/分子细胞免疫学大同市重点实验室,山西 大同 037009
• Subjects: 脂多糖; BV2 cells; lipopolysaccharides; NLRP3炎性小体; 远志皂苷元; inflammatory response; senegenin; NLRP3 inflammasome; 炎症反应; 小胶质细胞
• ISSN: 0577-7402
• DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.0199.2024.0906

R742%R285.5; 目的 探究远志皂苷元(SEN)通过核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/NOD样受体蛋白3(NLRP3)通路缓解小鼠小胶质细胞炎症反应的机制.方法 将BV2小鼠小胶质细胞随机分为对照组、模型组、SEN组与MCC950组.对照组细胞不做处理,模型组细胞加入1 μg/ml脂多糖(LPS),SEN组细胞加入1 μg/ml LPS+4 μmol/L SEN,MCC950组加入1 μg/ml LPS+10 μmol/L MCC950,作用24 h.采用CCK-8法检测不同浓度SEN对BV2细胞活力的影响.采用Griess法测定上清液一氧化氮(NO)释放量;实时荧光定量PCR测定NLRP3、淋巴细胞凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、胱天蛋白酶-1(caspase-1)、白细胞介素(IL)-1β和IL-18 mRNA的表达水平;免疫荧光染色检测ASC、IL-1β、Nrf2和血红素加氧酶-1(HO-1)的表达水平;Western blotting检测NLRP3、caspase-1、ASC、IL-1β、IL-18、Nrf2、HO-1及核因子κB(NF-κB)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达水平.结果 CCK-8法检测结果显示,2～20 μmol/L SEN处理的BV2细胞活力与对照组差异无统计学意义(P>0.05).与对照组比较,模型组BV2细胞活力明显下降(P<0.05);与模型组比较,4 μmol/L SEN组BV2细胞活力明显恢复(P<0.05).Griess法检测结果显示,与对照组比较,模型组细胞NO释放量明显增加(P<0.01);实时荧光定量PCR和Western blotting检测结果显示,与对照组比较,模型组细胞NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β和IL-18 mRNA和蛋白表达水平均明显增高(P<0.05);免疫荧光染色结果显示,与对照组比较,模型组细胞iNOS、NF-κB蛋白表达水平增高,Nrf2和HO-1表达水平下降,差异均有统计学意义(P<0.05).与模型组比较,SEN组和MCC950组细胞NO释放量减少,NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β、IL-18 mRNA和蛋白表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05);SEN组iNOS和NF-κB表达水平降低,免疫荧光染色显示Nrf2易位到核内,Nrf2和HO-1蛋白表达明显增多,差异均有统计学意义(