骨髓间充质干细胞来源外泌体抑制高糖诱导的腹膜间皮细胞EMT

R692.5; 目的 探讨骨髓间充质干细胞外泌体(BMSCs-Exo)对高糖腹膜透析液(PDF)作用下人腹膜间皮细胞系(HMrSV5)发生上皮-间充质转化(EMT)的影响及其作用机制.方法 采用透射电镜、纳米颗粒追踪分析仪和Western blot对BMSCs-Exo进行鉴定;将HMrSV5细胞进行分组:1)对照组;2)不同浓度PDF(1.5％、2.5％、4.25％)组;3)siNLRP3组;4)siNC组;5)BMSCs-Exo组.Western blot检测EMT标志物及NLRP3炎性体通路蛋白的表达,RT-qPCR检测mRNA表达,ELISA检测细胞上清中炎性因子表达量.结果 BMSCs...

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Published in基础医学与临床 Vol. 44; no. 8; pp. 1149 - 1156
Main Authors 赵俊丽, 朱君君, 詹秋楠, 刘苗
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 上海市浦东新区周浦医院上海健康医学院附属周浦医院肾内科,上海 201318 2024
Subjects
间充质干细胞外泌体
peritoneal mesothelial cells
NLRP3
上皮-间充质转化(EMT)
epithelial-mesenchymal transition
bone marrow mesenchymal stem cell-derived exosomes
腹膜间皮细胞
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ISSN1001-6325
DOI10.16352/j.issn.1001-6325.2024.08.1149

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Summary:R692.5; 目的 探讨骨髓间充质干细胞外泌体(BMSCs-Exo)对高糖腹膜透析液(PDF)作用下人腹膜间皮细胞系(HMrSV5)发生上皮-间充质转化(EMT)的影响及其作用机制.方法 采用透射电镜、纳米颗粒追踪分析仪和Western blot对BMSCs-Exo进行鉴定;将HMrSV5细胞进行分组:1)对照组;2)不同浓度PDF(1.5％、2.5％、4.25％)组;3)siNLRP3组;4)siNC组;5)BMSCs-Exo组.Western blot检测EMT标志物及NLRP3炎性体通路蛋白的表达,RT-qPCR检测mRNA表达,ELISA检测细胞上清中炎性因子表达量.结果 BMSCs-Exo呈双层膜结构的圆形囊泡,直径40～150 nm,外泌体特异标记物CD9、CD81、TSG101和Alix阳性;与对照组相比,PDF组细胞中α-SMA、vimentin、NLRP3、pro-caspase-1 及 pro-IL-1β 表达明显上调,而 E-cadherin 表达下调(P＜0.05);PDF 组细胞上清中TGF-β1、IL-1β和IL-18表达量显著提高(P＜0.05).siNLRP3组细胞α-SMA表达下降,而E-cadherin表达明显上调.与 4.25％PDF 组比较,BMSCs-Exo 组细胞 E-cadherin 表达上调,而 vimentin、α-SMA、NLRP3、pro-caspase-1、pro-IL-1β蛋白表达下调(P＜0.05);ELISA结果显示,BMSCs-Exo可下调4.25％PDF诱导的细胞上清IL-1β、IL-18、TGF-β1的水平(P＜0.05).结论 高糖PDF通过激活NLRP3炎性体信号途径诱导腹膜间皮细胞EMT,BMSCs-Exo可通过抑制该通路改善腹膜间皮细胞EMT.
ISSN:1001-6325
DOI:10.16352/j.issn.1001-6325.2024.08.1149