miR-146a-5p靶向SMAD4抑制人前列腺癌细胞系PC-3增殖和侵袭

R737.25; 目的 探究miR-146a-5p可否靶向调控SMAD4 对前列腺癌细胞增殖、侵袭的影响及其机制.方法 RT-qPCR检测前列腺癌组织及各细胞系中miR-146a-5p的表达量,分析其表达与Gleason评分的关系;MTT实验、BrdU实验、集落生成实验、划痕实验、Transwell小室法及裸鼠成瘤实验分析miR-146a-5p对前列腺癌细胞增殖、成瘤、迁移及侵袭等能力的影响;RT-qPCR检测组织SMAD4 的表达量,分析其与miR-146a-5p表达量的关系;荧光素酶报告基因实验分析miR-146a-5p与SMAD4 的靶向关系,功能回复实验验证miR-146a-5p/SM...

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Published in基础医学与临床 Vol. 43; no. 8; pp. 1215 - 1221
Main Authors 刘彼得, 李循, 王书恒, 靳宏勇, 张小安, 李九智
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 新疆维吾尔自治区人民医院 泌尿中心 泌尿外科研究室,新疆 乌鲁木齐 830001 2023
Subjects
miR-146a-5p
前列腺癌
SMAD4
prostate cancer
TIM3
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Summary:R737.25; 目的 探究miR-146a-5p可否靶向调控SMAD4 对前列腺癌细胞增殖、侵袭的影响及其机制.方法 RT-qPCR检测前列腺癌组织及各细胞系中miR-146a-5p的表达量,分析其表达与Gleason评分的关系;MTT实验、BrdU实验、集落生成实验、划痕实验、Transwell小室法及裸鼠成瘤实验分析miR-146a-5p对前列腺癌细胞增殖、成瘤、迁移及侵袭等能力的影响;RT-qPCR检测组织SMAD4 的表达量,分析其与miR-146a-5p表达量的关系;荧光素酶报告基因实验分析miR-146a-5p与SMAD4 的靶向关系,功能回复实验验证miR-146a-5p/SMAD4 信号轴在前列腺癌中的作用;Western blot检测miR-146a-5p及SMAD4 对细胞核内SMAD2/SMAD3 复合体表达量的影响,并通过荧光素酶报告基因实验及染色质免疫共沉淀实验探究miR-146a-5p/SMAD4/SMAD2/SMAD3 信号轴对TIM3 的靶向调控作用.结果 miR-146a-5p在前列腺癌组织及细胞系中低表达(P＜0.05),其表达量与Gleason评分负相关(P＜0.05),且在PC-3细胞中的表达量最低;miR-146a-5p抑制PC-3细胞的增殖及侵袭能力(P＜0.05);SMAD4 为miR-146a-5p的下游靶基因;SMAD4 促进SMAD2/SMAD3 复合体入核并靶向激活TIM3.结论 miR-146a-5p靶向调控SMAD4 抑制PC-3细胞的增殖及侵袭,SMAD2/SMAD3/TIM3 信号通路可能为其下游机制.
ISSN:1001-6325
DOI:10.16352/j.issn.1001-6325.2023.08.1215