激活蛋白2家族基因真核表达载体的构建及其功能鉴定

R735.7; 目的 构建激活蛋白2(AP-2)家族真核表达载体,探究AP?2α、AP?2β、AP?2γ对人肝癌细胞系HepG2增殖及迁移的影响.方法 模板为人卵巢文库,通过PCR扩增AP?2α、AP?2β以及AP?2γ,并与载体pCDNA3.0?FLAG连接得到真核表达载体pCDNA3.0?FLAG?AP?2α/β/γ;通过CCK8法、克隆形成实验和划痕实验分别验证AP?2α、AP?2β以及AP?2γ对肝癌HepG2细胞增殖和迁移的影响.结果 成功构建了AP?2基因家族主要成员AP?2α、AP?2β、AP?2γ的真核表达载体,经酶切及基因测序鉴定重组质粒AP?2家族转录因子构建成功,并且能够...

Full description

Saved in:
Bibliographic Details
Published in基础医学与临床 Vol. 42; no. 12; pp. 1829 - 1834
Main Authors 米月, 蒋琦炜, 沈雁婕, 张德宇, 叶棋浓
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 军事科学院 军事医学研究院 生物工程研究所 细胞工程研究室,北京100850 2022
Subjects
真核表达
HepG2细胞系
人AP-2基因家族
肝癌
Online AccessGet full text

Cover

More Information
Summary:R735.7; 目的 构建激活蛋白2(AP-2)家族真核表达载体,探究AP?2α、AP?2β、AP?2γ对人肝癌细胞系HepG2增殖及迁移的影响.方法 模板为人卵巢文库,通过PCR扩增AP?2α、AP?2β以及AP?2γ,并与载体pCDNA3.0?FLAG连接得到真核表达载体pCDNA3.0?FLAG?AP?2α/β/γ;通过CCK8法、克隆形成实验和划痕实验分别验证AP?2α、AP?2β以及AP?2γ对肝癌HepG2细胞增殖和迁移的影响.结果 成功构建了AP?2基因家族主要成员AP?2α、AP?2β、AP?2γ的真核表达载体,经酶切及基因测序鉴定重组质粒AP?2家族转录因子构建成功,并且能够成功表达;同时经过功能鉴定,显示AP?2家族蛋白可以显著抑制HepG2细胞的增殖以及迁移(P<0.05).结论 构建的AP?2家族基因真核表达载体转染至HepG2细胞后,明显抑制HepG2细胞增殖和迁移.
ISSN:1001-6325
DOI:10.16352/j.issn.1001-6325.2022.12.1829