上调miR-140增强人CML细胞株KBM5R对伊马提尼的敏感性

R733.7; 目的 探究miR-140对伊马替尼(IM)耐药慢性髓系白血病(CML)细胞株KBM5R的IM敏感性的影响及其机制.方法 分别用RT-qPCR和Western blot检测CML细胞系KBM5和KBM5R细胞中miR-140和Bcl-2的表达水平.将miR-NC或miR-140 mimic转染入KBM5R细胞,然后用25～100 nmol/L的IM处理细胞24 h,CCK-8法检测细胞活力.用100 nmol/L的IM处理已转染miR-NC或miR-140 mimic的KBM5R细胞24 h,流式细胞测量术检测细胞凋亡,JC-1染色检测线粒体膜电位,Western blot检测c...

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Published in基础医学与临床 Vol. 42; no. 9; pp. 1344 - 1349
Main Authors 郑研, 李岚, 高秋英, 牛奔, 张维华
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 陕西省人民医院 血液内科,陕西 西安710068 2022
Subjects
Bcl-2
伊马替尼
KBM5细胞
miR-140
敏感性
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Summary:R733.7; 目的 探究miR-140对伊马替尼(IM)耐药慢性髓系白血病(CML)细胞株KBM5R的IM敏感性的影响及其机制.方法 分别用RT-qPCR和Western blot检测CML细胞系KBM5和KBM5R细胞中miR-140和Bcl-2的表达水平.将miR-NC或miR-140 mimic转染入KBM5R细胞,然后用25～100 nmol/L的IM处理细胞24 h,CCK-8法检测细胞活力.用100 nmol/L的IM处理已转染miR-NC或miR-140 mimic的KBM5R细胞24 h,流式细胞测量术检测细胞凋亡,JC-1染色检测线粒体膜电位,Western blot检测cleaved caspase-3表达.用生物信息学与荧光酶活性分析法验证miR-140与Bcl-2之间的靶向关系.结果 与KBM5细胞比较,KBM5R细胞中miR-140表达水平明显降低(P<0.01),Bcl-2表达水平明显增加(P<0.001).在IM存在的条件下,与miR-NC组比较,miR-140 mimic转染组的细胞活力明显降低(P<0.01或P<0.001),细胞凋亡明显增加(P<0.001),线粒体膜电位明显降低(P<0.001),cleaved caspase-3表达水平明显增加(P<0.001).Bcl-2是miR-140的靶标.结论 miR-140可能通过抑制靶基因Bcl-2来增加KBM5R细胞对IM的敏感性.
ISSN:1001-6325
DOI:10.16352/j.issn.1001-6325.2022.09.1344