芒果苷抑制脂多糖诱导小鼠肺泡巨噬细胞炎症反应的机制研究

• Published in: 南方农业学报 Vol. 55; no. 7; pp. 1907 - 1915
• Main Authors: 李亚娟, 方秋果, 李玉树, 孙芹芹, 李舜, 黄云飞, 付强
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 佛山大学动物科技学院,广东佛山 528225%佛山大学动物科技学院,广东佛山 528225 2024; 华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州 510641
• Subjects: TLR4/NF-κB signaling pathway; inflammatory factor; 小鼠肺泡巨噬细胞(MH-S); lipopolysaccharide(LPS); 炎症因子; TLR4/NF-κB信号通路; mouse alveolar macrophage(MH-S); 芒果苷; mangiferin; 脂多糖(LPS)
• ISSN: 2095-1191
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2024.07.004

S853.74; [目的]探究芒果苷抑制脂多糖(LPS)诱导的炎症反应作用机制,为筛选治疗脓毒症的候选药物提供科学依据.[方法]选取小鼠肺泡巨噬细胞(MH-S)为研究对象,通过CCK-8试剂检测芒果苷对MH-S细胞的毒性作用,根据细胞毒性试验确定芒果苷的作用浓度为100 μg/mL,以正常培养的MH-S细胞为对照,使用10 μg/mL LPS处理24 h构建体外炎症模型(LPS组),再以100 μg/mL芒果苷干预24 h(干预组);通过ELISA检测MH-S细胞上清液中的炎症因子(IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-18)含量,采用实时荧光定量PCR检测IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-18基因表达情况,并以Western blotting和免疫荧光法检测TLR4/NF-κB信号通路的变化.[结果]芒果苷浓度低于287.60 μg/mL时,对MH-S细胞无明显的毒性作用.与对照组相比,LPS组MH-S细胞中的IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-18基因相对表达量极显著升高(P<0.01,下同),细胞上清液中的IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-18含量显著(P<0.05,下同)或极显著升高;但以芒果苷干预后,IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-18基因的相对表达量及其分泌水平均显著降低,表明芒果苷能有效抑制LPS诱导MH-S细胞的炎症反应.此外,LPS组MH-S细胞中的NF-κB基因相对表达量与蛋白表达水平极显著高于对照组,经芒果苷干预后NF-κB基因相对表达量与蛋白表达水平均显著下降,表明芒果苷能有效抑制LPS诱导MH-S细胞中核转录因子的表达;LPS组MH-S细胞表面的TLR4表达水平明显升高,但经芒果苷干预后MH-S细胞表面的TLR4表达水平明显降低,说明芒果苷能有效抑制LPS诱导MH-S细胞表面TLR4的表达.[结论]芒果苷对MH-S细胞的增殖无明显抑制作用,其半数增殖抑制率(IC50)为287.60 μg/mL;芒果苷对LPS诱导的MH-S细胞炎症反应具有良好的保护作用,其作用机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路激活而减少炎症因子的分泌有关.