甘蔗宿根矮化病病原菌一推测膜蛋白基因(Lxx18460)单克隆抗体的制备和检测

Q-331; [目的]对甘蔗宿根矮化病病原菌(Leifsonia xyli subsp.xyli,Lxx)一推测为抗o'k因子的膜蛋白基因(Lxx18460)进行研究,为今后研究该基因在感病甘蔗体内表达打下基础.[方法]诱导表达并纯化含有推测为抗o'k因子的膜蛋白Lxx1.8460基因的pET-30a质粒菌液,委托南京金斯瑞生物科技有限公司制备单克隆抗体;用Western blotting对细菌及感病和健康甘蔗样品总蛋白进行检测.[结果]Lxx18460基因具有特异性,只存在于甘蔗Lxx中.ELISA单克隆抗体效价大于1∶512000,能够灵敏地检测细菌总蛋白和甘蔗样品蛋白...

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Published in南方农业学报 Vol. 47; no. 3; pp. 382 - 388
Main Authors 邵敏, 张小秋, 张琨琨, 杨丽涛, 李杨瑞
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 中国农业科学院 甘蔗研究中心/广西农业科学院/农业部广西甘蔗生物技术与遗传改良重点实验室/广西甘蔗遗传改良重点实验室,南宁530007 2016
广西大学 农学院/亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,南宁,530005%广西大学 农学院/亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,南宁530005
Subjects
Lxx18460基因
ratoon stunting disease
Lxx18460 gene
Western blotting detection
甘蔗宿根矮化病
monoclonal antibody
ELISA检测
Western blotting检测
ELISA detection
单克隆抗体
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ISSN2095-1191
DOI10.3969/j:issn.2095-1191.2016.03.382

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Summary:Q-331; [目的]对甘蔗宿根矮化病病原菌(Leifsonia xyli subsp.xyli,Lxx)一推测为抗o'k因子的膜蛋白基因(Lxx18460)进行研究,为今后研究该基因在感病甘蔗体内表达打下基础.[方法]诱导表达并纯化含有推测为抗o'k因子的膜蛋白Lxx1.8460基因的pET-30a质粒菌液,委托南京金斯瑞生物科技有限公司制备单克隆抗体;用Western blotting对细菌及感病和健康甘蔗样品总蛋白进行检测.[结果]Lxx18460基因具有特异性,只存在于甘蔗Lxx中.ELISA单克隆抗体效价大于1∶512000,能够灵敏地检测细菌总蛋白和甘蔗样品蛋白.Western blotting检测结果表明,Lxx18460基因在细菌中和感病甘蔗样品中表达,在健康甘蔗样品中几乎不表达.[结论]Lxx18460基因具有特异性,是Lxx中的抗o'k因子的膜蛋白基因,能够在细菌和感病甘蔗样品体外进行表达.
ISSN:2095-1191
DOI:10.3969/j:issn.2095-1191.2016.03.382