荧光探针置换型核酸适配体传感器检测生物小分子

利用硫磺素T(ThT)作为置换型荧光探针,分别构建了 3种核酸适配体生物传感器,用于赭曲霉毒素A(OTA)、黄曲霉毒素B1(AFB1)和腺苷(Adenosine)3种生物小分子的快速检测.当靶标分子不存在时,ThT与核酸适配体结合形成复合物,具有较强的荧光响应;加入靶标分子后,ThT的荧光强度减弱,通过监测荧光信号的变化实现对靶标分子的定量检测.详细探究了检测机理,圆二色光谱分析结果表明,加入ThT和靶标分子后,核酸适配体的构象没有明显变化,只是此构象比例增加,因此系统的荧光强度的降低并非由于靶标诱导核酸适配体结构变化,而是因为分子置换作用所致;通过等摩尔连续变化法测定ThT与OTA、AFB1...

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Published in分析化学 Vol. 52; no. 5; pp. 674 - 中插13
Main Authors 杨成, 崔胜楠, 王越, 王国峰, 李程铭, 谷双超, 薛长颖
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 大连理工大学化学学院 大连 116024%大连理工大学生物工程学院 大连 116024 2024
Subjects
置换型荧光探针
硫磺素T
Adenosine
Thioflavin T
赭曲霉毒素A
黄曲霉毒素B1
Aflatoxin B1
Displacement fluorescent probe
核酸适配体传感器
腺苷
Aptasensor
Ochratoxin A
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ISSN0253-3820
DOI10.19756/j.issn.0253-3820.231159

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Summary:利用硫磺素T(ThT)作为置换型荧光探针,分别构建了 3种核酸适配体生物传感器,用于赭曲霉毒素A(OTA)、黄曲霉毒素B1(AFB1)和腺苷(Adenosine)3种生物小分子的快速检测.当靶标分子不存在时,ThT与核酸适配体结合形成复合物,具有较强的荧光响应;加入靶标分子后,ThT的荧光强度减弱,通过监测荧光信号的变化实现对靶标分子的定量检测.详细探究了检测机理,圆二色光谱分析结果表明,加入ThT和靶标分子后,核酸适配体的构象没有明显变化,只是此构象比例增加,因此系统的荧光强度的降低并非由于靶标诱导核酸适配体结构变化,而是因为分子置换作用所致;通过等摩尔连续变化法测定ThT与OTA、AFB1、腺苷的核酸适配体的化学计量比分别为1∶1、1∶1和2∶1,并且解离常数均大于靶标分子与核酸适配体的解离常数.因此,本方法的检测原理是靶标分子置换与核酸适配体结合的荧光探针(ThT),通过测定被靶标分子置换出的ThT荧光强度的变化实现对靶标分子的定量检测.在最优实验条件下,3种小分子的检出限分别为0.8 nmol/L(OTA)、1.3 nmol/L(AFB1)和0.1 μmol/L(腺苷).本方法无需标记、操作简单、检测成本低,具有良好的选择性和较低的检出限.进一步开发了基于本方法的检测试剂盒,可用于实际样品中3种生物小分子的检测.
ISSN:0253-3820
DOI:10.19756/j.issn.0253-3820.231159