硫化氢信号分子与L-乳酸脱氢酶蛋白相互作用机制的研究

硫化氢(H2S)作为信号分子与目标蛋白相互作用而实现信号传导机制的研究一直是研究热点.本研究以L-乳酸脱氢酶为目标蛋白,选用3种H2S供体试剂(NaHS、Na2S、PS),采用分子荧光实时监测L-乳酸脱氢酶活性变化,研究H2S与目标蛋白的相互作用. SDS-PAGE电泳结果显示,H2S不是通过形成二硫键/三硫键的方式与L-乳酸脱氢酶蛋白相互作用;圆二色谱结果表明,L-乳酸脱氢酶的二级结构发生变化,提示H2S可能存在半胱氨酸巯基衍生能力,以硫烷硫存在的PS具有最强的巯基作用力;MALDI-TOF-MS/MS分析结果表明, L-乳酸脱氢酶蛋白中部分半胱氨酸巯基位点发生了硫烷化,进一步揭示了H2S是...

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Published in分析化学 Vol. 46; no. 7; pp. 1145 - 1151
Main Authors 朱艳雯, 刘玲, 孙玮洁, 颜廷才, 檀德宏, 张瑶, 白冰
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 沈阳农业大学食品学院,沈阳,110866%沈阳师范大学美术与设计学院,沈阳,110034 2018
Subjects
Hydrogen sulfide
S-Sulfuration
Cysteine thiols
硫烷化
硫化氢
L-Lactic dehydrogenase
L-乳酸脱氢酶
半胱氨酸巯基
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ISSN0253-3820
DOI10.11895/j.issn.0253-3820.171510

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Summary:硫化氢(H2S)作为信号分子与目标蛋白相互作用而实现信号传导机制的研究一直是研究热点.本研究以L-乳酸脱氢酶为目标蛋白,选用3种H2S供体试剂(NaHS、Na2S、PS),采用分子荧光实时监测L-乳酸脱氢酶活性变化,研究H2S与目标蛋白的相互作用. SDS-PAGE电泳结果显示,H2S不是通过形成二硫键/三硫键的方式与L-乳酸脱氢酶蛋白相互作用;圆二色谱结果表明,L-乳酸脱氢酶的二级结构发生变化,提示H2S可能存在半胱氨酸巯基衍生能力,以硫烷硫存在的PS具有最强的巯基作用力;MALDI-TOF-MS/MS分析结果表明, L-乳酸脱氢酶蛋白中部分半胱氨酸巯基位点发生了硫烷化,进一步揭示了H2S是通过与活性半胱氨酸巯基位点硫烷化的方式与L-乳酸脱氢酶发生作用.
ISSN:0253-3820
DOI:10.11895/j.issn.0253-3820.171510