肿瘤细胞基因转导载体聚乙烯亚胺的合成及筛选

• Published in: 癌症 Vol. 26; no. 7; pp. 790 - 794
• Main Authors: 姚元虎, 刘永彪, 冯永, 冯霞, 徐冬梅, 姚思德
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 徐州医学院肿瘤研究所,江苏,徐州,221002%南京医科大学第一附属医院肿瘤科,江苏,南京,210029%徐州医学院附属医院中心实验室,江苏,徐州,221002%中国科学院上海应用物理研究所,上海,201800 2007
• Subjects: 光化学; 基因转导; 聚乙烯亚胺; Bel7402细胞; A549细胞
• ISSN: 1000-467X
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-467X.2007.07.025

R730.5; 背景与目的:选择合适的载体是基因治疗成功的关键之一,近年来一种新型多聚阳离子化合物--聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)作为高效低毒的基因转导载体得到广泛重视.本研究应用光化学法制备系列不同粒径的PEI纳米凝胶,初步探讨其转导效率与粒径之间的关系,筛选理想的肿瘤基因转导载体.方法:光化学法制备PEI,光相干光谱仪测定粒径,并用扫描电子显微镜和原子力显微镜表征;以PEI为载体将增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescence protein,EGFP)报告基因分别转入Bel7402细胞和A549细胞,荧光显微镜下计数和流式细胞仪检测转染率.结果:光相干光谱仪检测PEI粒径38～200 nm,扫描电子显微镜和原子力显微镜检测其形貌多为球形.荧光显微镜下计数和流式细胞仪检测86.9 nm PEI(4 μg)介导EGFP基因(2 μg)时转染率最高,Bel7402细胞分别为(32.75±1.01)%、(32.40±1.41)%,A549细胞分别为(29.81±1.84)%、(30.00±1.86)%;与脂质体相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论:光化学法合成的PEI是有效的基因转导载体,PEI粒径为86.9 nm转染最为有效.