超顺磁性葡聚糖氧化铁纳米颗粒的制备及其作为基因载体的可行性研究

R394; 背景与目的:磁性纳米颗粒作为基因载体在肿瘤基因治疗中的应用得到了迅速发展.为了能获得驱动目的基因高效稳定表达、安全无害、靶向性高、简便的新型非病毒型基因导入和治疗系统,本研究探讨超顺磁性葡聚糖氧化铁纳米颗粒(superparamagnetic dextran iron oxide nanoparticles,SDION)的制备及其作为体外基因载体的可行性.方法:采用化学共沉淀法制作SDION,通过丙烯葡聚糖凝胶S-300HR色谱和离心法分离SDION,用透射电镜、粒度分析仪和磁力计对SDION进行分析.以绿色荧光蛋白(GFP-C2)质粒为靶基因,通过氧化还原法构建SDION-GFP...

Full description

Saved in:
Bibliographic Details
Published in癌症 Vol. 23; no. 10; pp. 1105 - 1109
Main Authors 曹正国, 周四维, 孙凯, 鲁雄兵, 罗刚, 刘继红
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科,湖北,武汉,430030 2004
Subjects
Online AccessGet full text

Cover

Loading…
More Information
Summary:R394; 背景与目的:磁性纳米颗粒作为基因载体在肿瘤基因治疗中的应用得到了迅速发展.为了能获得驱动目的基因高效稳定表达、安全无害、靶向性高、简便的新型非病毒型基因导入和治疗系统,本研究探讨超顺磁性葡聚糖氧化铁纳米颗粒(superparamagnetic dextran iron oxide nanoparticles,SDION)的制备及其作为体外基因载体的可行性.方法:采用化学共沉淀法制作SDION,通过丙烯葡聚糖凝胶S-300HR色谱和离心法分离SDION,用透射电镜、粒度分析仪和磁力计对SDION进行分析.以绿色荧光蛋白(GFP-C2)质粒为靶基因,通过氧化还原法构建SDION-GFP-C2复合物,用紫外分光光度计和琼脂糖凝胶电泳检测两者的结合率.以脂质体转染作为对照,荧光显微镜分别观察SDION和脂质体体外转染GFP-C2入膀胱癌细胞BIU-87的转染效率.结果:SDION直径在3~8 nm之间,有效粒径为59.2nm,比饱和磁化强度为0.23 emu/g.分别经10 mmol/L的高碘酸钠氧化、0.5 mol/L的硼氢化钠还原作用后的SDION和GFP的结合比例最大,SDION对GFPDNA的转染效率为45%左右,明显高于脂质体的转染效率(30%左右).结论:SDION可通过氧化还原反应与GFP质粒相连,在体外可将GFP基因成功转染入人膀胱癌BIU-87细胞.
ISSN:1000-467X
DOI:10.3321/j.issn:1000-467X.2004.10.001