黄芩甙对重组人蛋白激酶 CK2全酶的抑制作用及其动力学分析

• Published in: 癌症 Vol. 23; no. 8; pp. 874 - 878
• Main Authors: 林小聪, 刘新光, 陈小文, 陈伟珠, 梁念慈
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 广东医学院生物化学与分子生物学研究所,广东,湛江,524023%深圳市儿童医院儿科研究所,广东,深圳,518026 2004
• Subjects: 黄芩甙; 全酶; 蛋白激酶 CK2; 重组蛋白; 酶动力学
• ISSN: 1000-467X
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-467X.2004.08.003

Q555+.7%Q784%Q814.1%R963; 背景与目的:蛋白激酶 CK2是一种在真核细胞中普遍存在的多功能的丝 /苏氨酸蛋白激酶.在许多实体瘤、白血病细胞中 CK2的活性均增高.其α及α′基因是原癌基因. CK2作为一种具有潜在抗肿瘤作用的分子靶点正日益受到重视.为了寻找肿瘤细胞内 CK2的特异性抑制剂,本研究观察黄芩甙体外对重组人蛋白激酶 CK2的抑制效果,并进行酶动力学分析以确定其抑制作用类型.方法:利用基因工程技术进行克隆、表达和纯化,获得重组人 CK2的α′及β亚基并在体外等摩尔混合构成 CK2全酶,测定不同条件下 CK2的活性. CK2活性通过测定转移到 CK2底物上的 [γ-32P]ATP的 32P的放射性活度来检测.结果:黄芩甙能显著抑制重组人蛋白激酶 CK2的活性( IC50=2.54μ mol/L).酶动力学分析表明,黄芩甙与 ATP呈非竞争性抑制 CK2的活性( Ki=7.73μ mol/L) ,与酪蛋白则呈混合性抑制 CK2的活( Ki=3.07μ mol/L).结论:黄芩甙是一种较强的体外蛋白激酶 CK2的抑制剂.