Study on alantolactone-induced differentiation of mesenchymal stem cells into vascular cells

• Published in: 传统医学研究（英文版） Vol. 3; no. 4; pp. 181 - 190
• Main Authors: Yan-Jiao Lu, Qiong Lu, Ruo-Ke Su, Gang Wang, Rui Tan
• Format: Journal Article
• Language: English
• Published: School of Life Sciences and Engineering, Southwest Jiaotong University, Chengdu, China%National Engineering Research Center for Biomaterials, Sichuan University, Chengdu, China%School of Life Sciences and Engineering, Southwest Jiaotong University, Chengdu, China 2018; College of Medicine, Southwest Jiaotong University, Chengdu, China
• Subjects: α-SMA; Angiogenesis; rMSCs; Stably transformed cell line; Alanlactone; VEGF; 稳转细胞株; 土木香内酯; 血管新生
• ISSN: 2413-3973; 2413-3973
• DOI: 10.12032/TMR201812077

为了从传统药物中高效筛选有促进血管生成活性的药物成份,我们构建了以血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)基因启动子作为药物作用靶点的HEK293细胞模型,该细胞中,VEGF基因启动子通过响应药物分子的刺激而调控荧光素酶报告基因的表达.这一细胞模型使我们能从大量药物单体分子中快速高效地初步筛选出有诱导血管生成的活性成分.我们进一步利用大鼠骨髓间充质干细胞(rMSC)对初步筛选出的土木香内酯进行了活性研究,以辛伐他汀为阳性对照探究土木香内酯对rMSC表达血管相关细胞标记分子——VEGF和α-平滑肌肌动蛋白(α-Smooth muscle actin,α-SMA)的影响,从而判断土木香内酯对rMSC向血管内皮细胞和血管平滑肌细胞诱导分化的作用.结果显示,0.1μM、1μM、3μM和5μM的土木香内酯均能上调HEK293模型细胞中荧光素酶的表达,与空白对照组比较有显著性差异,其中3μM土木香内酯的作用优于相同浓度的辛伐他汀(P=0.036),其它浓度的土木香内酯作用与辛伐他汀相当,没有显著性差异;1μM土木香内酯处理rMSCs 3天后,VEGF和α-SMA基因的mRNA相对表达量较空白对照组均有显著性差异,但是5μM土木香内酯作用弱于相同浓度的辛伐他汀(P<0.05);免疫荧光法检测1μM土木香内酯诱导rMSCs 3天后,原位表达的α-SMA和VEGF蛋白(FITC标记)的荧光亮度均比空白对照组强,和5μM的辛伐他汀无差异.上述结果显示了我们构建的血管活性药物分子高效筛选体系的可靠性,并从分子和蛋白水平证实了土木香内酯的血管诱导功能.