Yes相关蛋白对人宫颈癌SiHa细胞生物学行为的影响

• Published in: 吉林大学学报（医学版） Vol. 51; no. 1; pp. 68 - 75
• Main Authors: 赵芳, 李珍玲, 朴丽花, 韩龙哲, 崔银姬, 权春姬, 金雪梅
• Format: Journal Article
• Language: Chinese
• Published: 山东省菏泽市立医院病理科,山东菏泽 274000%延边大学附属医院病理科,吉林延吉 133000%延边大学医学院组织学与胚胎学教研室,吉林延吉 133000%延边大学附属医院病理科,吉林延吉 133000 2025; 海南省妇女儿童医学中心病理科,海南海口 570100; 延边大学附属医院病理科,吉林延吉 133000
• Subjects: Yes-associated protein; Cell proliferation; 细胞迁移; 宫颈肿瘤; Yes相关蛋白; Cervical neoplasm; Cell migration; 细胞增殖
• ISSN: 1671-587X
• DOI: 10.13481/j.1671-587X.20250109

R737.32%R363.21; 目的:探讨Yes相关蛋白(YAP)沉默对人宫颈癌(CC)SiHa细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响.方法:对人CC细胞株SiHa细胞进行体外培养,慢病毒YAPshRNA转染到SiHa细胞,建立稳定转染的YAP-shRNA实验组(sh-YAP组)和空载质粒对照组(对照组),采用Western blotting法检测YAP沉默效果;免疫荧光法检测2组细胞中肌动蛋白(F-actin)微丝数量及形态变化;CCK-8法、Transwell小室实验和细胞划痕实验检测2组细胞存活率、迁移及侵袭细胞数以及细胞划痕愈合率;Western blotting法检测2组细胞中上皮-间质转化(EMT)相关标记物[E钙黏蛋白(E-cadherin)和锌指转录因子(Snail)]、DNA损伤修复相关蛋白γ(γ-H2AX)和凋亡相关蛋白[c-MYC和B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)]蛋白表达水平.结果:慢病毒YAPshRNA转染SiHa细胞后,SiHa细胞中YAP蛋白表达水平明显降低(P＜0.05).免疫荧光实验,YAP沉默后SiHa细胞中F-actin微丝稀疏且排列规则,细胞数量减少、细胞呈现蜷缩的状态.CCK-8法,与对照组比较,sh-YAP组培养24和48 h后SiHa细胞存活率明显降低(P＜0.01);Transwell小室实验和细胞划痕实验,与对照组比较,sh-YAP组的SiHa细胞迁移和侵袭细胞数明显减少(P＜0.01),细胞划痕愈合率明显降低(P＜0.05);Western blotting法,与对照组比较,sh-YAP组细胞中E-cadherin蛋白表达水平升高(P＜0.05),c-MYC、Bcl-2和γ-H2AX蛋白表达水平降低(P＜0.05或P＜0.01).结论:YAP基因沉默导致人CC SiHa细胞F-actin的解聚,并调控细胞凋亡和DNA损伤修复,可能会逆转EMT进程,从而抑制肿瘤细胞增殖和迁移.