Methods for Studying Memory B-Cell Immunity Against Malaria

• Main Author: Jahnmatz, Peter
• Format: Dissertation
• Language: English
• Published: ProQuest Dissertations & Theses 01.01.2020
• Subjects: Anemia; Antigens; Blood & organ donations; Bone marrow; Clinical trials; Cloning; Coma; Cytokines; Drug resistance; Erythrocytes; Fatalities; Immune system; Immunology; Infections; Medicine; Morphology; Mutation; Parasites; Parasitology; Pathogenesis; Pharmacology; Plasma; Polymorphism; Tetanus; Vaccines
• ISBN: 9798744414856

Malaria är en sjukdom som orsakas av parasiter från släktet Plasmodium och vållar över 420.000 dödsfall årligen. Malaria är ett globalt problem, men koncentrerat främst till afrikanska länder söder om Sahara där majoriteten av dödsfallen sker. Barn är speciellt i fara då de ännu inte hunnit utveckla skyddande immunitet mot parasiten. För att framställa nya effektiva vacciner behöver man förstå hur immunitet mot malaria utvecklas. Länge har man vetat att antikroppar mot parasiten ärskyddande. Antikroppar produceras av s.k. B-cellersom finns i bland annat blod, lymfkörtlar och mjälten. B-celler utgör en viktig del av immunförsvaret då de efter att ha träffat på något kroppsfrämmande, t.ex. en parasit, kan utvecklas till s.k. ”minnes B-celler” vars uppdrag är att snabbt producera antikroppar vid nästa infektion. Mycket tyder på att minnes B-celler är viktiga för immunförsvaret mot malaria, men studier har begränsats av det låga antal av dessa celler i blod. För att hitta och analysera dessa celler i blod, krävs därför känsliga metoder särskilt då det vid malaria är viktigt att kartlägga svaret mot flera olika parasitantigener.Syftet med denna avhandling var att vidareutveckla metoden ”B-cells FluoroSpot” som möjliggör analys av minnes B-celler mot olika kroppsfrämmande proteiner s.k. ”antigen” och sedan använda metoden för att få djupare inblick i hur immunitet mot malaria utvecklas. I Studie I, utvecklade vi metoden ”reversed B-cell FluoroSpot” och visade med celler från möss att den kan användas för att detektera antigen-specifika B-celler mot fyra olika antigener samtidigt. I Studie II adapterade vi metoden för studie på minnes B-celler hos människa och för att samtidigt detektera minnes B-celler mot antigener från hepatit B (gulsot), tetanus toxoid (stelkramp) och cytomegalovirus (ett vanligt förekommande virus hos människor). Vi visade också att vi kunde använda metoden för att mäta minnes B-celler före och efter hepatit B vaccination. I Studie III adapterade vi metoden för att mäta minnes B-celler mot malariaparasitens antigener och använde metoden för att följa hur immunsvaret mot parasitantigen utvecklas över tid i personer som infekterats med malaria för första gången eller hos de som haft malaria vid flera tillfällen. I Studie IV använde vi metoden för att mäta minnes B-celler mot parasit-antigener i barn som bor i malaria-endemiska områden i östra Kenya, och identifierade att faktorer så som ålder, och antal kliniska malaria episoder påverkade det uppmätta immunsvaret, samt identifierade immunsvar som påverkade risken att få malaria vid ett senare tillfälle.Sammanfattningsvis är den nya B-cell FluoroSpot som vi tagit fram en känslig metod för analys av lågfrekventa minnes B-celler mot malaria och andra infektioner/antigen. Studierna har också bidragit till kunskapen kring hur minnes B-celler utvecklas och bibehålls efter malaria. Metoden har användning för att kartlägga minnessvaret vid infektioner och efter vaccination. Denna kunskap kan komma att vara viktig vid framställandet av nya vacciner