LPS a través de TLR4 previene la diferenciación de fibroblasto a miofibroblasto cardiaco inducida por TGF-[beta]1

• Main Author: Santana Sepúlveda, Roxana Carolina
• Format: Dissertation
• Language: Spanish
• Published: Universidad de Chile 27.10.2014; 2014

Memoria para optar al título de Químico Farmacéutico Autorizada por el autor, pero con restricción para ser publicada a; texto completo hasta diciembre de 2015, en el Portal de Tesis Electrónicas. La diferenciación de fibroblastos cardiacos (FC) a miofibroblastos cardiacos (MFC); es gatillada por TGF-β1, la cual señaliza principalmente a través de las proteínas; Smad. Los MFC muestran como principal característica la presencia de; microfilamentos citoplásmicos de α-SMA, estructuradas como fibras de estrés, lo; que les permite la contracción. Por otro lado, LPS es un ligando del receptor TLR4,; que señaliza de manera dependiente e independiente de MyD88 teniendo como; principal efector el NF-κB, induciendo así la expresión de genes de citoquinas; proinflamatorias. Sin embargo, aunque se ha descrito un efecto antagónico entre; la señalización inducida por LPS y la señalización canónica de TGF- β, a la fecha; no se ha estudiado si en FC y en MFC la expresión de α-SMA inducida por TGF-β1; es antagonizada por LPS.; Para responder estas interrogantes se utilizaron FC y MFC de ratas adultas, y se; determinó in vitro la capacidad de LPS de inhibir la expresión de α-SMA. Además,; utilizando TAK- 242, un inhibidor de las vías intracelulares dependientes de TLR4,; se determinó que los efectos gatillados por LPS ocurrían a través de este receptor.; La utilización de los inhibidores PD98059, LY29002 y BAY 11-7082 permitió; determinar que en FC LPS a través de la vía de señalización PI3K/Akt, disminuye; la expresión de α-SMA. Por lo que nuestros resultados demuestran que LPS; inhibe la expresión de α-SMA en FC, a través del receptor TLR4 mediante la; activación de vía de señalización PI3K/Akt y que LPS es capaz de disminuir la; expresión de α-SMA en MFC a través de TLR4 inhibiendo la mantención del; fenotipo miofibroblasto The difference between cardiac fibroblasts (CF) and cardiac myofibroblast (CMF); is triggered by TGF-β1, which mainly signals via Smad proteins. The main; characteristic of CMF is cytoplasmic microfilaments of α-SMA; this are structured; as stress fibers, which allow the contraction of CMF. Also, LPS is a ligand of the; TLR4 receptor that signals via a dependant and independent pathway of MyD88; whose main factor is NF-κB; this induces the expression of inflammatory cytokine; genes. However, despite an opposite effect has been described between the; signaling induced by LPS and the canonical signaling of TGF-β, the opposite effect; that LPS may have on the expression of α-SMA on CF and CMF induced by; TGF-β1 has not been studied so far.; In order to answer these questions, CF and CMF of adult rats were used; this; showed in vitro evidence that LPS is capable of inhibiting the expression of α-SMA.; Also, with the use of TAK-242, which is an inhibitor of the dependant intracellular; domain of TLR4, we determined that the effects triggered by LPS occurred through; said receptor.; Using PD98059, LY29002 and BAY11-7082 inhibitors allowed us to determine; that, via the PI3K/Akt signaling pathway, LPS decreases the expression of α-SMA; in CF. Therefore, our results show that LPS inhibit the expression of α-SMA in CF; through the TLR4 receptor via the activation of the PI3K/Akt signaling pathway,; and that LPS is capable of decreasing the expression of α-SMA in CMF through; TLR4 receptor, which inhibits the maintenance of the myofibroblast phenotype