Emdogain(R)Gel中のGrowth factorについて

• Published in: 日本歯周病学会会誌 Vol. 45; no. suppl-2; p. 112
• Main Authors: 鈴木進一, 長野孝俊, 五味一博, 新井高, 深江允, 大井田新一郎
• Format: Journal Article
• Language: Japanese
• Published: 日本歯周病学会 2003
• ISSN: 0385-0110

[目的]近年, 歯周組織再生におけるbFGF, BMP, TGF-βなどのGrowth factorの有用性が指摘されており, エナメル抽出物中にTGF-β, BMP様活性物質が含まれているという報告があることから, Emdogain(R)Gel(EMD)中にもTGF-β, BMPが含まれている可能性がある. そこで, EMD中に存在することが示唆されるTGF-β, BMPについてレポーター遺伝子を用いて調べることにした. [材料および方法]TGF-β1のAssayにMv, 1, Lu(ミンクの肺上皮細胞), BMP2のAssayにC2C12(筋原細胞)を用いた. Mv. 1, Lu cellに, TGF-β1に反応するPAI-1調節領域を有するレポーター遺伝子(Firefly Luciferase)と内部対照に利用するプラスミドベクター(Seapansy Luciferase)をtransfectionし, TGF-β1, EMDを加え, 24時間培養後, Dual-Lueiferase Reporter assay(Promega)により測定した. また, 同様にBMP2のAssayには, BMP2に反応するId-1調節領域を有するレポーター遺伝子(Firefly Luciferase)を用い, TGF-β1, BMP2, EMDなどのfactorを加え, Assayした. これらの結果は, Firefly/Seapansyにより補正した. [結果]Mv, 1, Lu cellを用いたTGF-β1のAssayでは, EMDを加えることで, TGF-β1と同様の反応がみられた. また, C2C12 cellを用いたBMP2のAssayでは, EMDを加えてみたが反応はみられなかった. BMP2にTGF-β1およびEMDを加えるとBMP2の反応は抑制された. [考察]以上の結果から, EMD中にTGF-β様活性物質が含まれていると考えられる. EMD中にBMP様活性物質が含まれている可能性はあるが, BMP様の活性はみとめられなかった. しかし, BMPはTGF-βおよびEMDにより抑制されていることから, EMD中のBMP活性は共存するTGF-β様活性物質により抑制されている可能性が示唆される. そのため, 現在fractionに分けたEMD精製物質を用いて, 同じ系で実験を行っている.