Izdvajanje, pročišćavanje i određivanje termodinamičkih značajki β-galaktozidaze iz badema (Amygdalus communis), upotrijebljene za uklanjanje laktoze iz mlijeka

• Published in: Food Technology and Biotechnology Vol. 51; no. 1; p. 53
• Main Authors: Pal, Ajay, Lobo, Melita, Khanum, Farhath
• Format: Paper
• Language: Croatian; English
• Published: Prehrambeno-biotehnološki fakultet, Sveučilište u Zagrebu 29.03.2013
• Subjects: almond; badem; intolerancija na laktozu; izdvajanje β-galaktozidaze; lactose intolerance; termodinamičke značajke; thermodynamic characterization; β-galactosidase extraction
• ISSN: 1330-9862; 1334-2606

U radu su optimirani sljedeći uvjeti za učinkovitu ekstrakciju β-galaktozidaze iz jezgri badema: tip, pH-vrijednost i ionska jakost pufera, te udjel polivinilpirolidona (PVP). Enzim je pročišćen taloženjem pomoću (NH4)2SO4 (15-60 %), gel-filtracijskom i ionsko-izmjenjivačkom kromatografijom. Gel-filtracijom i SDS-PAGE elektroforezom utvrđena je molekularna masa β-galaktozidaze od približno 62 kDa, što potvrđuje da je enzim monomeran. Enzim je imao optimalnu aktivnost pri pH=5,5, a bio je stabilan u rasponu pH-vrijednosti od 5 do 6. Vrijednosti kinetičkih parametara toplinske inaktivacije β-galaktozidaze (ΔH°, ΔS° i ΔG°) pokazuju da je došlo do znatne promjene u strukturi i odmotavanja proteinske uzvojnice enzima. Uporabom β-galaktozidaze iz praha dobivenog usitnjavanjem jezgri badema hidrolizirano je čak do 50 % laktoze u mlijeku, što upućuje na to da se bademi mogu upotrijebiti za proizvodnju mlijeka sa smanjenim udjelom laktoze (ili bez laktoze), namijenjenog osobama koje ne podnose laktozu.