Učinak epidermalnog i inzulinu sličnog čimbenika rasta-1 na ekspanziju kumulusa, dozrijevanje jezgre i oplodnju bivoljih jajnih stanica u jednostavnim hranilištima DMEM i Hamovom F-10

• Published in: Veterinarski arhiv Vol. 74; no. 1; p. 13
• Main Authors: Kumar, Dinesh, Purohit, Govind Narayan
• Format: Paper
• Language: Croatian; English
• Published: Veterinarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu 21.02.2004
• Subjects: bivol; buffalo; epidermal growth factor; epidermalni čimbenik rasta; insulin-like growth factor; jajna stanica; oocyte; čimbenik rasta sličan insulinu
• ISSN: 0372-5480; 1331-8055

Cilj istraživanja bio je utvrđivanje mogučeg učinka epidermalnog čimbenika rasta (EGF) i inzulinu-sličnog čimbenika rasta 1 (IGF-1) na ekspanziju kumulusa, dozrijevanje jezgre i oplodnju bivoljih jajnih stanica dozrelih i oplođenih in vitro u dvjema različitim hranilištima bez dodatka seruma: Eaglovom hranilištu preinačenom po Dulbeccu (DMEM) i Hamovom hranilištu F-10. Jajne stanice su dozrele in vitro tijekom 24 sata u DMEM ili Hamovom F-10 hranilištu bez dodatka i uz dodatak EGF i IGF-1. Nakon 24 sata dozrijevanja in vitro, jajne stanice su osjemenjene spermom pripremljenom u BO hranilištu uz dodatak 10 mg ml-1 heparina i 0,5% goveđeg serumskog albumina. U prvom pokusu je udio jajnih stanica koje su sasvim ekspandirale bio signifikantno viši (P<0,01) u DMEM hranilištu obogaćenom s EGF i IGF-1 i iznosio je 51,2%, u odnosu na kontrolne skupine gdje je ekspandiralo samo 18,0% jajnih stanica. U Hamovom hranilištu F-10 znatno više (P<0,01) jajnih stanica pokazalo je potpunu ekspanziju kada je bilo obogaćeno s EGF i IGF-1 (52,9% u odnosu na 19,4% u kontrolnoj skupini). Jajne stanice bile su zatim fiksirane te im je određeno dozrijevanje jezgre. Značajno veći (P<0,01) broj jajnih stanica dosegao je M-II stadij u DMEM i Hamovom F-10 hranilištu uz dodatak EGF i IGF-1 (78,0% i 83,5% u odnosu na 43,0% i 46,3% u kontrolnim skupinama). U drugom pokusu, 24 sata nakon inseminacije signifikantno viši (P<0,01) udio jajnih stanica bio je oplođen i u DMEM i Hamovom F-10 hranilištu uz dodatak EGF i IGF-1 (45,2% i 48,6% u odnosu na 14,6% i 15,0% u kontrolnim skupinama). Ovi rezultati upućuju na sljedeće zaključke: (1) dodatak EGF i IGF-1 u DMEM i Hamovom F-10 hranilištu poboljšali su ekspanziju kumulusa, dozrijevanje jezgre i oplodnju bivoljih jajnih stanica; (2) čini se da oba hranilišta imaju isti učinak na ekspanziju kumulusa, dozrijevanje jezgre i oplodnju bivoljih jajnih stanica.