Obtencion de un soporte de afinidad para la purificacion de fosfolipasas A2
El objetivo de la presente invención es la sÃntesis de un soporte de afinidad con un fosfolÃpido inmovilizado (fofatidilcolina de yema de huevo inmovilizada a un gel amino) como ligando para la purificación de fosfolipasas A2. La Sepharose CL-4B fue activada, oxidada y aminada. La fosfatidilcoli...
Saved in:
Published in | Revista cubana de química Vol. 28; no. 2; p. 595 |
---|---|
Main Authors | , , , , , |
Format | Journal Article |
Language | Spanish |
Published |
Editorial Universitaria de la Republica de Cuba
01.05.2016
|
Subjects | |
Online Access | Get full text |
Cover
Loading…
Summary: | El objetivo de la presente invención es la sÃntesis de un soporte de afinidad con un fosfolÃpido inmovilizado (fofatidilcolina de yema de huevo inmovilizada a un gel amino) como ligando para la purificación de fosfolipasas A2. La Sepharose CL-4B fue activada, oxidada y aminada. La fosfatidilcolina fue inmovilizada covalentemente controlándose mediante la determinación de fosfatos en los materiales de partida y los lavados. La validez de los soportes cromatográficos obtenidos se verificó mediante la purificación de fracciones con actividad fosfolipásica provenientes de las anémonas marinas Condylactis gigantea y Stichodactyla helianthus, asà como del veneno de la serpiente Crotalus durisus terrificus. Se obtuvieron perfiles de elución con un máximo tÃpico para este procedimiento y tipo de enzima. La actividad fosfolipásica A2 se verificó cualitativamente a través de una TLC luego de la incubación de los picos obtenidos frente a la fosfatidilcolina purificada y a un sustrato fluorescente: 1-palmitoil-2-NBD-C12-PC. |
---|---|
ISSN: | 0258-5995 |