Fecundación in vitro y sus efectos sobre la tasa de división y desarrollo embrionario en ovocitos de cordera, con y sin células del cuúmulus: estudio comparativo del uso de la albumina sérica bovina y el suero de oveja en los medios de capacitación

• Published in: Revista científica (Universidad del Zulia. Facultad de Ciencias Veterinarias. División de Investigación) Vol. 21; no. 2; p. 145
• Main Authors: Cano Torres, Rafael, Gil Huerta, Lydia, González Ortí, Noelia, Martínez Asensio, Felisa, Malo Ladrero, Clara, Pinto Mualuzanga, Daniel
• Format: Journal Article
• Language: English
• Published: Universidad del Zulia, Facultad de Ciencias Veterinarias 01.03.2011
• ISSN: 0798-2259

El objetivo de este estudio fue evaluar la albúmina sérica bovina (ASB) y el suero de oveja (SO), en los medios de capacitación seminal, en función de la tasa de división y desarrollo embrionario de ovocitos de corderas, madurados in vitro con (COCs) y sin células del cúmulus (ODs). El medio base de capacitación fue el fluido oviductal sintético con 2,38 mg/mL Hepes y 25 [micrón]g/mL Gentamicina, suplementado con 4 mg/mL ASB o 20% (v/v) SO. La fecundación se realizó con 1 x [10.sup.6] espermatozoides/ mL, seleccionados mediante un gradiente por movimiento a la superficie. Las tasas de división y desarrollo embrionario fueron evaluadas a 48 y 168 hrs. post inseminación, no encontrándose diferencias estadísticas en función de los medios de capacitación (ASB vs SO): 21,5 vs 24,3% para COCs y 10,8 vs 8,0% para ODs si se trata de división, y en caso de desarrollo 16,7 vs 16,6% para COCs y 2,1 vs 8,8% para ODs. Sin embargo, considerando la presencia o ausencia de células del cúmulus en el ovocito, hubo diferencias altamente significativas (P<0,001) a favor de los COCs, quienes a su vez obtuvieron mejores resultados de maduración que los ODs: 69,5 vs 31,1%, respectivamente (P<0,001). Estos resultados confirman que la ASB y el SO son buenos agentes de capacitación para los protocolos de producción in vitro de embriones. Por otro lado se confirmó que, con la eliminación de las células del cúmulus previo a la maduración, ésta se reduce significativamente, lo mismo que las tasas de división y desarrollo embrionario. Sin embargo, puesto que parte de estos ovocitos consiguen desarrollarse a mórulas y blastocistos podrían ser utilizados en combinación con las nuevas técnicas reproductivas en clonación, producción de células madre, entre otras. Palabras clave: Capacitación espermática, fecundación in vitro, corderas, embriones. The aim of this work was to study the effect of Bovine Serum Albumin (BSA) and Sheep Serum (SS) on seminal capacitation medium in accordance with division rate and embryo development of female lamb in vitro maturated oocytes with (COCs) or without cumulus cells (ODs). The capacitation medium was synthetic oviductal fluid (SOF) supplemented with 2.38 mg/mL Hepes and 25 [micrón]g/mL Gentamicyne, with either 4 mg/mL BSA or 20% (v/v) SS. Sperms used for fecundation were isolated by swim up, with 1 x [10.sup.6] sperms/mL concentration. Cleavage rate and embryo development were observed at 48 and 168 h post insemination, no finding any significant influence of the capacitation medium tested (BSA vs SS): 21.5 vs 24.3% for COCs and 10.8 vs 8% for ODs on cleavage rate, or on development 16.7 vs 16.6% for COCs and 2.1 vs 8.8% for ODs. Nevertheless, the oocyte type significantly influenced (P<0,001) the maturation rate, COCs oocytes got better maturation rates than ODs; 69.5 vs 31.1%, respectively. These results confirm that both BSA and SS are good capacitation agents for in vitro embryo production protocols. On the other side, it confirmed that removal of cumulus cells prior in vitro maturation reduces maturation, cleavage and embryo development rates. However, a part of these oocytes get develop to the morula stage, so it can't be reject to be used in combination with new reproductive techniques. Key words: Sperm capacitation, In vitro fecundación, lambs, embryos.