Construction and verification of double T-DNA plant expression vector of the LFY gene

LFY基因是从从野生型拟南芥中克隆出的一个与调控花分生组织启动相关的基因,它有促进植物提早开花的作用。用PCR方法从克隆载体上扩增出LFY基因并在两端添加XhoⅠ酶切位点,将其连接在用XhoⅠ切除了hyg基因的pCAMBIA1301表达载体上,得到去除选择标记的LFY基因植物表达载pCAM-BIA1301-LFY。质粒pCAMBIA1301经HindⅡ/EcoRⅠ双酶切补平自连后得到去除多克隆位点的质粒pCAMBIA1301-,再经SacII/SphI双酶切后插入到经SacⅡ酶切的pCAMBIA1301-LFY中。建成双T-DNA植物表达载体pCAMBIA1301-LFY-hyg-,经酶切鉴定...

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Published inMolecular plant breeding Vol. 14; no. 2
Main Author Sun Lei, Zhang Qixiang
Format Journal Article
LanguageChinese
Published 01.03.2006
Subjects
CHRYSANTHEME
CHRYSANTHEMUMS
CRISANTEMOS
GENE TRANSFER
GENETIC VECTORS
http://www.fao.org/aos/agrovoc#c_24846
http://www.fao.org/aos/agrovoc#c_27532
http://www.fao.org/aos/agrovoc#c_33342
TRANSFERENCIA DE GENES
TRANSFERT DE GENE
VECTEUR GENETIQUE
VECTORES GENETICOS
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Summary:LFY基因是从从野生型拟南芥中克隆出的一个与调控花分生组织启动相关的基因,它有促进植物提早开花的作用。用PCR方法从克隆载体上扩增出LFY基因并在两端添加XhoⅠ酶切位点,将其连接在用XhoⅠ切除了hyg基因的pCAMBIA1301表达载体上,得到去除选择标记的LFY基因植物表达载pCAM-BIA1301-LFY。质粒pCAMBIA1301经HindⅡ/EcoRⅠ双酶切补平自连后得到去除多克隆位点的质粒pCAMBIA1301-,再经SacII/SphI双酶切后插入到经SacⅡ酶切的pCAMBIA1301-LFY中。建成双T-DNA植物表达载体pCAMBIA1301-LFY-hyg-,经酶切鉴定证明了所构建载体的正确性。将此双T-DNA载体用农杆菌介导法转化菊花叶片,期望得到无选择标记含LFY基因的转基因菊花。
Bibliography:F30
2007002034
ISSN:1672-416X