A SOLUBLE THROMBOMODULIN-BASED ONE-STAGE ASSAY FOR VITAMIN K-DEPENDENT COAGULATION-INHIBITING PROTEINS

• Main Author: MATSCHINER, JOHN, T
• Format: Patent
• Language: English
• Published: 15.04.1993
• Subjects: INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIRCHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES; MEASURING; PHYSICS; TESTING

The present invention provides a novel one-stage assay which uses soluble thrombomodulin for directly determining the functional status in plasma of the vitamin K-dependent coagulation-inhibiting proteins, protein C and protein S. The method comprises combining a blood plasma test sample and a coagulation-activating substance in a calcium-free solution, then adding soluble thrombomodulin and calcium ions to initiate a coagulation reaction, measuring the time required for the test plasma sample to clot, comparing the measured clot time to that of standard control plasma samples, including protein C- and protein S-deficient plasma controls, and then using the compared clot time values for determining the functional status of protein C and protein S in the individual from whom the test plasma sample was taken. The functional status of the vitamin K-dependent coagulation-inhibiting proteins is used to determine the risk of thrombosis in the host individual._______ L'invention concerne une nouvelle méthode en un temps utilisant de la thrombomoduline soluble afin de déterminer directement l'état fonctionnel dans du plasma des protéines inhibant la coagulation dépendante de la vitamine K, la protéine C et la protéine S. Le procédé consiste à combiner un échantillon de test de plasma sanguin et une substance activant la coagulation dans une solution exempte de calcium, ensuite à ajouter de la thrombomoduline soluble et des ions calcium afin d'amorcer une reaction de coagulation, à mesurer le temps necessaire à l'échantillon de plasma de test pour se coaguler, à comparer le temps de coagulation mesuré à celui d'échantillons de plasma témoins standards, parmi lesquels des témoins de plasma présentant une déficience en protéine C et en protéine S, puis à utiliser les valeurs de temps de coagulation comparées afin de déterminer l'état fonctionnel de la protéine C et de la protéine S chez l'individu sur lequel on a prélevé un échantillon de plasma de test. On utilise l'état fonctionnel des protéines inhibant la coagulation dépendante de la vitamine K afin de déterminer le risque de thrombose chez l'individu hôte.