METHOD OF CREATING GENE EDITED ANIMALS COMPRISING A WILD TYPE ALLELE

• Main Authors: CIGAN, Andrew Mark, BEATON, Benjamin
• Format: Patent
• Language: English; French
• Published: 20.06.2024
• Subjects: AGRICULTURE; ANIMAL HUSBANDRY; BEER; BIOCHEMISTRY; CARE OF BIRDS, FISHES, INSECTS; CHEMISTRY; COMPOSITIONS THEREOF; CULTURE MEDIA; ENZYMOLOGY; FISHING; FORESTRY; HUMAN NECESSITIES; HUNTING; METALLURGY; MICROBIOLOGY; MICROORGANISMS OR ENZYMES; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; NEW BREEDS OF ANIMALS; PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; SPIRITS; TRAPPING; VINEGAR; WINE

Provided herein are methods of producing heterozygous edited animals by injecting zygotes with low amounts of ribonucleoprotein (RNP) complex. The data cited herein show that more heterozygous animals are obtained from zygotes injected with 100,000 - 450,000, or approximately 111,250 copies of an RNP complex. The methods disclosed herein are particularly useful for editing of bovine or porcine zygotes. Heterozygous animals are preferred when homozygous embryos fail to develop, or when homozygous animals are sterile, therefore making it difficult to breed the edit into a line of animals. L'invention concerne des procédés de production d'animaux modifiés hétérozygotes par injection de zygotes avec de faibles quantités de complexe ribonucléoprotéine (RNP). Les données citées ici montrent que plus d'animaux hétérozygotes sont obtenus à partir de zygotes injectés avec entre 100 000 et 450 000, ou approximativement 111 250 copies d'un complexe RNP. Les procédés de l'invention sont particulièrement utiles pour l'édition de zygotes bovins ou porcins. Les animaux hétérozygotes sont préférés lorsque des embryons homozygotes ne se développent pas, ou lorsque des animaux homozygotes sont stériles, ce qui rend difficile de sélectionner l'option d'édition dans une lignée d'animaux.